引用本文： 劉慶蓉, 夏慶杰. 原發性肝癌患者血清轉鐵蛋白、前白蛋白和總膽汁酸與肝臟儲備功能的關系. 華西醫學, 2014, 29(10): 1883-1886. doi: 10.7507/1002-0179.20140569 復制
原發性肝癌（PHC）是主要的肝臟腫瘤疾病，在全球發病率逐年上升，其在全球癌癥死亡病因中居第3位，在我國位居癌癥死亡病因的第2位。血清轉鐵蛋白（TRF）、前白蛋白（PAB）和總膽汁酸（TBA）水平作為肝功能化驗的重要指標在PHC患者中的病情指示價值越來越受到人們的重視，然而，尚未見上述三者與PHC患者肝臟儲備功能關系的系統研究報道。我們對我院就診的PHC患者進行了Child-Pugh A、B、C級分組，并針對上述3個生物化學（生化）指標進行了系統的分析比較，以期獲得它們與肝臟儲備功能的關系以及三者聯合檢測在PHC病情診斷中的價值。
1 資料與方法
1.1 一般資料
2010年3月－2013年2月間PHC患者164例，男93例，女71例；年齡29～75歲，平均47.2歲；所有患者均經實驗室檢查、B型超聲、CT、MRI、肝穿刺活體組織檢查及手術后病理檢查等確診，并符合1999年中國抗癌協會肝癌專業委員會修訂并通過的PHC臨床診斷標準，即甲胎蛋白（AFP）≥400 μg/L，能排除妊娠、生殖系統胚胎源性腫瘤、活動性肝病及轉移性肝癌，并能觸及腫大、堅硬及有大結節狀腫塊的肝臟或影像學檢查有肝癌特征的占位性病變者；或AFP＜400 μg/L，能排除妊娠、生殖系統胚胎源性腫瘤、活動性肝病及轉移性肝癌，并有2種影像學檢查有肝癌特征的占位性病變者或有2種肝癌標志物（異常凝血酶原、γ谷氨酰轉肽酶同功酶Ⅱ、α-L-巖藻糖苷酶及CA19-9等）陽性及1種影像學檢查有肝癌特征的占位性病變者；或者有肝癌的臨床表現并有肯定的肝外轉移灶（包括肉眼可見的血性腹水或在其中發現癌細胞）并能排除轉移性肝癌者。根據肝功能Child-Pugh分級標準[1]A級67例，B級55例，C級42例。另選取同期健康體檢者58例作為對照組，其中男31例，女27例；年齡21～69歲，平均39.4歲。
1.2 儀器與方法
研究對象早晨空腹抽取外周靜脈血3～5 mL，及時分離血清。采用ACCESS2全自動化學發光儀和配套試劑盒（美國貝克曼庫爾特有限公司）化學發光免疫分析法測定血清TRF水平；其測定原理為以金剛己烷作為發光底物，采用雙抗體夾心模式[2, 3]，即標本中的抗原與固相中的單克隆抗體結合，再與液相中以金剛己烷標記的多克隆抗體結合檢測其發光數從而獲得TRF的含量。采用免疫透射比濁法檢測血清PAB水平，采用酶循環法檢測血清TBA水平，試劑均由上海潤達公司提供，儀器為日立7600-020全自動生化分析儀。
1.3 統計學方法
采用SPSS 17.0統計軟件處理數據，計量資料以均數 ± 標準差表示。各組血清TRF、PAB和TBA水平比較采用單因素方差分析；采用Pearson相關分析變量間的相關性。檢驗水準α=0.05。
2 結果
2.1 各組血清TRF、PAB和TBA水平檢測結果比較
與對照組比較，Child-Pugh A、B、C級組的血清TRF、PAB水平均降低，TBA水平升高（P＜0.05）；與Child-Pugh A級組比較，Child-Pugh B、C級組的血清TRF、PAB水平均降低，TBA水平升高（P＜0.05）；與Child-Pugh B級組比較，Child-Pugh C級組的血清TRF、PAB水平均降低，TBA水平升高（P＜0.05）。見表 1。
表1
各組血清TRF、PAB和TBA水平比較檢測結果（2.2 相關性分析
對PHC各級組的血清TRF、PAB和TBA水平檢測結果進行線性相關性分析，結果表明，血清TRF和PAB水平呈正相關（r=0.927，P＜0.001），血清TRF與血清TBA水平均呈負相關（r=-0.454，P＜0.001）；血清PAB與血清TBA水平均呈負相關（r=-0.432，P＜0.001）。見圖 1～3。
圖1
血清TRF和PAB水平散點圖
圖2
血清TRF與血清TBA水平散點圖
圖3
血清PAB與血清TBA水平散點圖
3 討論
PHC指原發于肝臟的惡性腫瘤，可分為肝細胞型肝癌、膽管細胞型肝癌及混合型肝癌，為最常見的肝癌類型。PHC在早期時無明顯癥狀，隨著病情的惡化其癥狀才會表現出來。血清TBA和TRF水平為反映肝實質損傷的重要指標，因而已作為常規的肝功能檢查指標應用于臨床。
血清TRF是由肝臟產生的一種糖蛋白，相對分子質量76 500，屬于球蛋白，約占血漿蛋白總量的0.3%～0.5%，是血清運輸鐵的主要載體，半衰期為8 d；每分子TRF運載2個鐵原子，不斷將鐵從肝實質細胞和腸上皮細胞等處轉運至骨髓。TRF上的鐵離子能被細胞利用，維持細胞的跨膜電位和離子轉運，作為核苷酸還原酶（DNA合成關鍵酶）的輔助因子，參與細胞增殖所必需的DNA合成，參與能量代謝的電子傳遞和細胞內許多氧化還原反應[4, 5]。使TRF下降的因素除鐵缺乏外，還包括炎癥狀態如長期嚴重感染[6]。其可能的因素是：網狀內皮系統吞噬清除過程中TRF起調理素作用而被利用消耗；粒細胞和組織蛋白酶的降解；肝細胞及巨噬細胞合成TRF受影響。本研究結果顯示，與對照組比較，Child-Pugh A、B、C級組的血清TRF水平明顯降低，降低程度隨著Child-Pugh A、B、C分級的升高而遞增，且各級之間的差異有統計學意義（P＜0.01），與石勝等[7]的結果一致。這可能是由于PHC患者隨著肝細胞破壞增加，TRF合成降低所致。因此，TRF檢測可作為反映PHC肝實質損害的重要參考指標。
血清PAB是由肝細胞和胃黏膜細胞合成的富含色氨酸的蛋白質，由4個相同的亞基組成，相對分子質量為54 980，是快速轉運蛋白之一，其主要生理功能是運輸甲狀腺素，也參與維生素A及去甲狀腺素的轉運。PAB生物半衰期為2～3 d，較白蛋白半衰期（21 d）短得多[8]。因此，在肝臟疾病時PAB的變化較白蛋白變化更為敏感，其血清含量的改變能敏感、快速反映肝臟損傷，有30%肝病患者血清白蛋白正常而PAB降低，對肝臟疾病的早期診斷、療效觀察和預后判斷有重要臨床應用價值[9]。有文獻報道血清PAB濃度變化能夠靈敏地反映肝臟儲備功能的變化和肝功能的損害[10, 11]。本研究結果顯示，與對照組比較，Child-Pugh A、B、C級組的血清PAB水平明顯降低，降低的程度隨著Child-Pugh A、B、C分級的升高而遞增，且各級之間的差異有統計學意義（P＜0.01）。這可能是由于PHC患者隨著肝細胞破壞增加，PAB合成降低所致。因此，PAB水平也可作為反映PHC肝實質損害的重要參考指標。
TBA是在肝細胞有關酶的作用下，膽固醇分解代謝的產物，是膽汁的主要成分，也是消化吸收功能所必需的物質，具有強酸性。正常情況下，在膽汁酸的腸肝循環過程中，肝細胞能高效地在肝臟內合成TBA，與甘氨酸或牛磺酸結合成為結合型膽汁酸，然后被肝細胞分泌入膽汁，隨膽汁至腸道后，在腸道內細菌作用下被水解成游離型膽汁酸，其中有97%被腸道重新吸收后回到肝臟，從而使TBA發揮最大生理效應，并防止TBA大量進入血液循環中對其他組織細胞產生毒害[12]。楊旭等[13]研究表明，TBA是唯一能同時反映肝臟的生物合成、分泌、攝取功能的檢測指標。一旦肝細胞受損，血中TBA顯著升高。因此測定血清TBA能較特異地反映肝臟的分泌狀態、合成與代謝、肝細胞損害等方面的情況，是反映肝臟損傷的靈敏指標。目前，國內外已有多篇文獻報道血清TBA水平能較敏感地反映肝炎、肝硬化的肝功能損害程度及肝臟儲備能力，且在消化系統腫瘤診斷方面也有價值[14-16]。本研究結果顯示，與對照組比較，Child-Pugh A、B、C級組的血清TBA水平明顯上升，且上升的程度隨著Child-Pugh A、B、C分級的升高而遞增，且各級之間的差異有統計學意義（P＜0.01），與石勝等[7]的結果一致。這可能是由于PHC患者隨著病情的進展，肝臟儲備功能逐漸下降，側支循環形成，毛細膽管排泄障礙等肝細胞破壞增加，TRF合成降低所致。因此，血清TBA是PHC估計病情、提示預后的較好指標。
本實驗研究結果還表明，TRF和PAB兩者水平呈正相關（r=0.927，P＜0.001），前兩者與TBA水平均呈負相關（r=0.454，P＜0.001；r=0.432，P＜0.001）；三者水平的變化具有較強的相關性。
綜上所述，血清TRF、PAB和TBA水平的變化與肝功能有密切的關系，是反映PHC患者的肝實質損傷的靈敏指標。聯合動態監測PHC患者血清TRF、TBA和TRF的水平對PHC的診斷、治療、療效觀察、預后判斷等方面都具有重要的臨床參考價值。
原發性肝癌（PHC）是主要的肝臟腫瘤疾病，在全球發病率逐年上升，其在全球癌癥死亡病因中居第3位，在我國位居癌癥死亡病因的第2位。血清轉鐵蛋白（TRF）、前白蛋白（PAB）和總膽汁酸（TBA）水平作為肝功能化驗的重要指標在PHC患者中的病情指示價值越來越受到人們的重視，然而，尚未見上述三者與PHC患者肝臟儲備功能關系的系統研究報道。我們對我院就診的PHC患者進行了Child-Pugh A、B、C級分組，并針對上述3個生物化學（生化）指標進行了系統的分析比較，以期獲得它們與肝臟儲備功能的關系以及三者聯合檢測在PHC病情診斷中的價值。
1 資料與方法
1.1 一般資料
2010年3月－2013年2月間PHC患者164例，男93例，女71例；年齡29～75歲，平均47.2歲；所有患者均經實驗室檢查、B型超聲、CT、MRI、肝穿刺活體組織檢查及手術后病理檢查等確診，并符合1999年中國抗癌協會肝癌專業委員會修訂并通過的PHC臨床診斷標準，即甲胎蛋白（AFP）≥400 μg/L，能排除妊娠、生殖系統胚胎源性腫瘤、活動性肝病及轉移性肝癌，并能觸及腫大、堅硬及有大結節狀腫塊的肝臟或影像學檢查有肝癌特征的占位性病變者；或AFP＜400 μg/L，能排除妊娠、生殖系統胚胎源性腫瘤、活動性肝病及轉移性肝癌，并有2種影像學檢查有肝癌特征的占位性病變者或有2種肝癌標志物（異常凝血酶原、γ谷氨酰轉肽酶同功酶Ⅱ、α-L-巖藻糖苷酶及CA19-9等）陽性及1種影像學檢查有肝癌特征的占位性病變者；或者有肝癌的臨床表現并有肯定的肝外轉移灶（包括肉眼可見的血性腹水或在其中發現癌細胞）并能排除轉移性肝癌者。根據肝功能Child-Pugh分級標準[1]A級67例，B級55例，C級42例。另選取同期健康體檢者58例作為對照組，其中男31例，女27例；年齡21～69歲，平均39.4歲。
1.2 儀器與方法
研究對象早晨空腹抽取外周靜脈血3～5 mL，及時分離血清。采用ACCESS2全自動化學發光儀和配套試劑盒（美國貝克曼庫爾特有限公司）化學發光免疫分析法測定血清TRF水平；其測定原理為以金剛己烷作為發光底物，采用雙抗體夾心模式[2, 3]，即標本中的抗原與固相中的單克隆抗體結合，再與液相中以金剛己烷標記的多克隆抗體結合檢測其發光數從而獲得TRF的含量。采用免疫透射比濁法檢測血清PAB水平，采用酶循環法檢測血清TBA水平，試劑均由上海潤達公司提供，儀器為日立7600-020全自動生化分析儀。
1.3 統計學方法
采用SPSS 17.0統計軟件處理數據，計量資料以均數 ± 標準差表示。各組血清TRF、PAB和TBA水平比較采用單因素方差分析；采用Pearson相關分析變量間的相關性。檢驗水準α=0.05。
2 結果
2.1 各組血清TRF、PAB和TBA水平檢測結果比較
與對照組比較，Child-Pugh A、B、C級組的血清TRF、PAB水平均降低，TBA水平升高（P＜0.05）；與Child-Pugh A級組比較，Child-Pugh B、C級組的血清TRF、PAB水平均降低，TBA水平升高（P＜0.05）；與Child-Pugh B級組比較，Child-Pugh C級組的血清TRF、PAB水平均降低，TBA水平升高（P＜0.05）。見表 1。
表1
各組血清TRF、PAB和TBA水平比較檢測結果（2.2 相關性分析
對PHC各級組的血清TRF、PAB和TBA水平檢測結果進行線性相關性分析，結果表明，血清TRF和PAB水平呈正相關（r=0.927，P＜0.001），血清TRF與血清TBA水平均呈負相關（r=-0.454，P＜0.001）；血清PAB與血清TBA水平均呈負相關（r=-0.432，P＜0.001）。見圖 1～3。
圖1
血清TRF和PAB水平散點圖
圖2
血清TRF與血清TBA水平散點圖
圖3
血清PAB與血清TBA水平散點圖
3 討論
PHC指原發于肝臟的惡性腫瘤，可分為肝細胞型肝癌、膽管細胞型肝癌及混合型肝癌，為最常見的肝癌類型。PHC在早期時無明顯癥狀，隨著病情的惡化其癥狀才會表現出來。血清TBA和TRF水平為反映肝實質損傷的重要指標，因而已作為常規的肝功能檢查指標應用于臨床。
血清TRF是由肝臟產生的一種糖蛋白，相對分子質量76 500，屬于球蛋白，約占血漿蛋白總量的0.3%～0.5%，是血清運輸鐵的主要載體，半衰期為8 d；每分子TRF運載2個鐵原子，不斷將鐵從肝實質細胞和腸上皮細胞等處轉運至骨髓。TRF上的鐵離子能被細胞利用，維持細胞的跨膜電位和離子轉運，作為核苷酸還原酶（DNA合成關鍵酶）的輔助因子，參與細胞增殖所必需的DNA合成，參與能量代謝的電子傳遞和細胞內許多氧化還原反應[4, 5]。使TRF下降的因素除鐵缺乏外，還包括炎癥狀態如長期嚴重感染[6]。其可能的因素是：網狀內皮系統吞噬清除過程中TRF起調理素作用而被利用消耗；粒細胞和組織蛋白酶的降解；肝細胞及巨噬細胞合成TRF受影響。本研究結果顯示，與對照組比較，Child-Pugh A、B、C級組的血清TRF水平明顯降低，降低程度隨著Child-Pugh A、B、C分級的升高而遞增，且各級之間的差異有統計學意義（P＜0.01），與石勝等[7]的結果一致。這可能是由于PHC患者隨著肝細胞破壞增加，TRF合成降低所致。因此，TRF檢測可作為反映PHC肝實質損害的重要參考指標。
血清PAB是由肝細胞和胃黏膜細胞合成的富含色氨酸的蛋白質，由4個相同的亞基組成，相對分子質量為54 980，是快速轉運蛋白之一，其主要生理功能是運輸甲狀腺素，也參與維生素A及去甲狀腺素的轉運。PAB生物半衰期為2～3 d，較白蛋白半衰期（21 d）短得多[8]。因此，在肝臟疾病時PAB的變化較白蛋白變化更為敏感，其血清含量的改變能敏感、快速反映肝臟損傷，有30%肝病患者血清白蛋白正常而PAB降低，對肝臟疾病的早期診斷、療效觀察和預后判斷有重要臨床應用價值[9]。有文獻報道血清PAB濃度變化能夠靈敏地反映肝臟儲備功能的變化和肝功能的損害[10, 11]。本研究結果顯示，與對照組比較，Child-Pugh A、B、C級組的血清PAB水平明顯降低，降低的程度隨著Child-Pugh A、B、C分級的升高而遞增，且各級之間的差異有統計學意義（P＜0.01）。這可能是由于PHC患者隨著肝細胞破壞增加，PAB合成降低所致。因此，PAB水平也可作為反映PHC肝實質損害的重要參考指標。
TBA是在肝細胞有關酶的作用下，膽固醇分解代謝的產物，是膽汁的主要成分，也是消化吸收功能所必需的物質，具有強酸性。正常情況下，在膽汁酸的腸肝循環過程中，肝細胞能高效地在肝臟內合成TBA，與甘氨酸或牛磺酸結合成為結合型膽汁酸，然后被肝細胞分泌入膽汁，隨膽汁至腸道后，在腸道內細菌作用下被水解成游離型膽汁酸，其中有97%被腸道重新吸收后回到肝臟，從而使TBA發揮最大生理效應，并防止TBA大量進入血液循環中對其他組織細胞產生毒害[12]。楊旭等[13]研究表明，TBA是唯一能同時反映肝臟的生物合成、分泌、攝取功能的檢測指標。一旦肝細胞受損，血中TBA顯著升高。因此測定血清TBA能較特異地反映肝臟的分泌狀態、合成與代謝、肝細胞損害等方面的情況，是反映肝臟損傷的靈敏指標。目前，國內外已有多篇文獻報道血清TBA水平能較敏感地反映肝炎、肝硬化的肝功能損害程度及肝臟儲備能力，且在消化系統腫瘤診斷方面也有價值[14-16]。本研究結果顯示，與對照組比較，Child-Pugh A、B、C級組的血清TBA水平明顯上升，且上升的程度隨著Child-Pugh A、B、C分級的升高而遞增，且各級之間的差異有統計學意義（P＜0.01），與石勝等[7]的結果一致。這可能是由于PHC患者隨著病情的進展，肝臟儲備功能逐漸下降，側支循環形成，毛細膽管排泄障礙等肝細胞破壞增加，TRF合成降低所致。因此，血清TBA是PHC估計病情、提示預后的較好指標。
本實驗研究結果還表明，TRF和PAB兩者水平呈正相關（r=0.927，P＜0.001），前兩者與TBA水平均呈負相關（r=0.454，P＜0.001；r=0.432，P＜0.001）；三者水平的變化具有較強的相關性。
綜上所述，血清TRF、PAB和TBA水平的變化與肝功能有密切的關系，是反映PHC患者的肝實質損傷的靈敏指標。聯合動態監測PHC患者血清TRF、TBA和TRF的水平對PHC的診斷、治療、療效觀察、預后判斷等方面都具有重要的臨床參考價值。
