引用本文： 徐秀連, 肖江衛, 魏壽江, 謝賢庸, 黃一帆, 田小兵, 王崇樹. Aurka在胃癌組織中的表達及其與臨床病理學特征關系的研究. 中國普外基礎與臨床雜志, 2016, 23(12): 1464-1469. doi: 10.7507/1007-9424.20160371 復制
胃癌是世界范圍內常見的惡性腫瘤之一，其死亡率居惡性腫瘤的第二位[1]。在我國，胃癌發病率位于全國腫瘤登記地區惡性腫瘤的第二位（32.23/10萬），死亡率位于第三位（23.90/10萬）[2]。腫瘤細胞生長的無限性和浸潤轉移是惡性腫瘤的最重要的特征，其侵襲和轉移途徑多樣，且是胃癌治療失敗并造成死亡率居高不下的重要原因[3]。胃癌的發生和發展是一個多基因、多因素和多階段的復雜演變過程，涉及多種癌基因和抑癌基因[4]。極光激酶（Aurora kinases）是近年來發現的一種參與有絲分裂的新絲氨酸/蘇氨酸激酶，包括Aurora-A、Aurora-B及Aurora-C三個成員，其中Aurora-A即Aurka主要調節中心體和微管的功能，確保中心體的正確分離和胞漿的完整分裂[5]，其基因突變或過表達也會引起細胞癌變。在許多腫瘤組織中均發現Aurka的高表達，如：乳腺癌[6]、卵巢癌[7]、食管癌[8]、胃癌[9-11]及結腸癌[12]。Aurka在多種實體瘤組織中異常表達，與腫瘤的發生發展密切相關，因此探尋Aurka與胃癌的關系及其機制將有助于為胃癌的治療提供新的靶點。筆者采用實時熒光定量逆轉錄聚合酶鏈反應（RT-PCR）以及免疫組織化學染色的方法，檢測了胃癌組織及其癌旁組織中Aurka蛋白及其mRNA的表達，并探討了Aurka mRNA與患者臨床病理學特征的相關性，研究其與胃癌增殖、浸潤及轉移的關系，旨在判斷Aurka基因能否作為預后及復發的預測指標。
1 資料與方法
1.1 研究對象
回顧性收集2011年4月至2013年9月期間于川北醫學院附屬醫院胃腸外科接受手術的198例胃癌患者的手術標本，包括癌組織和癌旁組織（即距離癌組織以遠6 cm以上的胃黏膜組織），男155例，女43例；年齡31~79歲、（58.6±11.7）歲，其中 < 50歲57例，50~60歲（含50歲）46例，60~70歲（含60歲）58例，≥70歲37例。據NCCN 2012版胃癌TNM分期標準[13]：Ⅰ期57例，Ⅱ期31例，Ⅲ期72例，Ⅳ期38例；T1期38例，T2期40例，T3期120例。據NCCN 2012版胃癌淋巴結轉移分級標準[13]：N0期76例，N1期38例，N2期53例，N3期31例。所有患者均未發生遠處轉移（M0期）。腫瘤分化程度：高分化7例，中分化53例，低分化138例。腫瘤位置：上1/3者49例，中1/3者53例，下1/3者96例；癌胚抗原（CEA）陽性35例，陰性163例；CA19-9陽性38例，陰性160例。所有病例均經術前胃鏡活檢和術后病理學檢查證實為胃癌，且近期均未服用過抗幽門螺桿菌（Helicobacter pylori，HP）藥物或行放化療治療。
1.2 主要試劑與儀器
TRIzol購自天根生化科技（北京）有限公司，逆轉錄試劑盒及RT-PCR試劑盒均購自寶生物工程（大連）有限公司，免疫組織化學Aurka一抗（單克隆、兔抗人）及免疫組織化學二抗試劑盒均購自Abcam公司；DAB試劑盒購自北京中杉金橋生物技術有限公司。ABI 7900 TH定量PCR儀系ABI公司產品。
1.3 方法
1.3.1 HP檢測
14C-尿素呼吸試驗兼簡單、快速以及價廉于一體，靈敏度大于95%，特異度高于90%，為HP感染的一線診斷方法[14]。本組患者術前即采用14C-尿素呼吸試驗的方法檢測HP值，定義 < 100 dpm為陰性，≥100 dpm為陽性[15]。有42例患者因胃食管結合部完全梗阻而未做此項檢查。
1.3.2 RT-PCR方法檢測Aurka基因的表達
剪取一定量的組織，用液氮研成粉末后按比例加入TRIzol，按TRIzol說明書進行總RNA的提取，用焦炭酸二乙酯處理后的水（簡稱DEPC水）溶解RNA，并檢測RNA的質量。按照逆轉錄試劑盒說明書將RNA逆轉錄為cDNA。Aurka和β-actin基因引物由上海Invitrogen公司合成。引物序列、產物大小、反應體系及擴增條件見表 1。樣品目的基因的相對表達水平（relative quantitation，RQ）用△△CT方法計算，即RQ=2-△△CT，其中△△CT=（組織Aurka基因的CT值-組織Aurka管家基因的CT值）-（組織β-actin基因的CT值-組織β-actin管家基因的CT值）[4]。△△CT值越高，基因表達水平越低。
表1
引物序列和產物大小
1.4 免疫組織化學染色方法檢測Aurka蛋白的表達
將腫瘤組織及癌旁組織用35%甲醛固定，石蠟包埋，切烤片，依次置二甲苯溶液、無水乙醇、85%乙醇及75%乙醇中各5 min以進行脫蠟處理；以0.01 mol/L PBS溶液（pH=7.4）漂洗3次，每次5 min；采用3%過氧化氫溶液室溫避光封閉，再置入0.01 mol/L枸櫞酸溶液（pH=6.0）中進行高溫抗原修復；滴加Aurka一抗（1 : 150），將切片置于保濕盒內，4 ℃冰箱過夜，復溫后用PBS溶液沖洗；滴加二抗（1 : 150），37 ℃放置15 min；以DAB顯色，蘇木精復染，鹽酸乙醇分化，再以自來水沖洗藍化；最后吹干、封片。用非胃腫瘤患者的正常胃黏膜組織作為陽性對照，用PBS溶液代替一抗作為陰性對照[16]。
陽性標準：40倍鏡下隨機選取5個視野（最后選取均值），根據陽性細胞比例和染色強度分別進行半定量評分。染色強度：沒有被染色，0分；淺棕色（弱），1分；棕色（中），2分；深棕色（強），3分。陽性細胞比例：≤3%，0分；4%~25%，1分；26%~50%，2分；51%~75%，3分；≥75%，4分。將強度分數與比例分數相乘：0分，陰性；1~2分，弱陽性；3~5分，中度陽性；6~12分，強陽性[17]。弱陽性、中度陽性和強陽性為陽性。
1.5 統計學方法
采用SPSS 17.0統計學軟件進行數據分析。計量資料用均數±標準差（x±s）表示，胃癌與癌旁組織中的Aurka mRNA的表達水平比較采用配對t檢驗，Aurka蛋白的表達陽性率比較采用配對χ2檢驗。胃癌組織中Aurka mRNA的表達水平與臨床病理學特征的關系分析時，臨床病理學特征為二分類時采用成組t檢驗，為多分類時采用單因素方差分析（兩兩比較采用SNK法）。HP陽性胃癌患者和HP陰性胃癌患者的Aurka mRNA表達水平比較采用成組t檢驗。檢驗水準α=0.05。
2 結果
2.1 胃癌組織和癌旁組織中Aurka mRNA的表達水平
胃癌組織與癌旁組織中Aurka mRNA的表達水平分別為16.62±1.85和7.10±1.59，胃癌組織的Aurka mRNA的表達水平較高（t=-38.58，P < 0.05）。
2.2 胃癌組織和癌旁組織中Aurka蛋白的表達情況
胃癌組織中Aurka蛋白的表達陽性率為93.9%（186/198），高于癌旁組織的16.2%（32/198），差異有統計學意義（P < 0.01），見表 2和圖 1。
表2
胃癌組織及癌旁組織中Aurka蛋白的表達情況（例）
圖1
Aurka蛋白在胃癌組織和癌旁組織中的表達（SP ×200）。1A：在胃癌組織中表達呈陽性；1B：在癌旁組織中表達呈陰性
2.3 胃癌組織中的Aurka mRNA表達水平與患者HP值的關系
42例患者因賁門部完全梗阻未行14C-尿素呼吸試驗，故在做此項分析時將其除外，共156例患者測定了HP值，其中陽性84例，陰性72例。陽性患者胃癌組織中Aurka mRNA的表達水平為15.38±1.73，高于HP陰性患者的7.20±1.86，差異有統計學意義（t=-3.74，P < 0.01）。
2.4 胃癌組織中的Aurka mRNA表達水平與患者臨床病理學特征的關系
胃癌組織中Aurka mRNA的表達水平與性別、年齡、腫瘤位置、術前CEA和CA19-9表達均無關（P > 0.05），而與腫瘤TNM分期、T分期、N分期及分化程度均有關（P < 0.05），TNM分期為Ⅲ期、Ⅳ期者的Aurka mRNA的表達水平高于Ⅰ期、Ⅱ期者（P < 0.01）；T分期為T3期者的Aurka mRNA的表達水平高于T1期、T2期者（P < 0.01）；N分期為N2期、N3期者的Aurka mRNA的表達水平高于N0期、N1期者（P < 0.01）；低分化程度者的Aurka mRNA的表達水平高于中分化+高分化者（P < 0.01）。見表 3。
表3
胃癌組織中Aurka mRNA的表達水平與其臨床病理學特征的關系（x±s）
3 討論
人類Aurka蛋白的編碼基因位于20q13.2，全長DNA包含1 212 kb的開放閱讀框，其編碼一種分子量為46×103、由403個氨基酸組成的絲氨酸/蘇氨酸激酶[18]。Aurka基因從中心體復制到有絲分裂結束都定位在中心體上[19-20]。此外，Aurka基因還出現在中心體附近的微管區域[21]，具有調節中心體分離、成熟以及紡錘體裝配的功能，并且在調節細胞周期的G2/M期轉變以及檢測點方面均發揮重要的作用[22]。1998年，人類的Aurka基因首次從結腸癌中克隆，同時Aurka基因被確定為癌基因，因為過量表達的Aurka基因可以使裸鼠生瘤[12]。Aurka基因在較多癌組織和癌細胞系中也顯著性表達上調，原因包括基因擴增和轉譯增強兩個方面[23-24]。Sen等[25]首先發現了初級乳腺中Aurka基因的過表達，隨后的研究又發現在人類乳腺[6]、卵巢[7]、食管[8]及胃部[9-11]的腫瘤中Aurka基因均存在一定程度的過表達。
腫瘤形成是一系列基因突變累積的結果，在各種腫瘤細胞中普遍存在基因組不穩定的現象[26]，胃癌也一樣。腫瘤相關基因，包括癌基因、腫瘤抑制基因和穩定基因（如DNA修復基因）的突變都會造成基因組的不穩定[27]。根據已知的Aurka基因的細胞學功能，筆者推測，Aurka基因可能通過兩方面的功能參與腫瘤的形成：一是在有絲分裂過程中抑制胞質分裂，導致腫瘤基因組的不穩定性[28-29]；二是抑制細胞周期檢驗點，幫助基因組不穩定的細胞繼續復制，不斷進入有絲分裂，從而導致細胞惡性增殖[30]。研究[31]表明，在食管癌中，從胃上皮化生→腸上皮化生→低級別上皮內瘤變→高級別上皮內瘤變→巴氏腺癌→食管癌，食管黏膜組織中Aurka mRNA的表達水平逐漸升高，可見其表達變化貫穿食管組織癌變的全過程，在食管癌的發生發展過程中扮演著重要角色。而在胃癌中鮮見此方面的報道，如果能夠通過研究發現它與胃癌某些病理學特征的關系，那么術前的胃鏡下活檢將有助于對腫瘤的初步評估，以指導臨床治療。然而類似的研究卻很少。Aurka基因的表達與胃癌病理學特征及HP值是否有關，目前國內外鮮見相關研究；其與胃癌患者外周血CEA和CA19-9的表達，以及與患者性別和年齡的關系，目前國內外也鮮見報道，值得我們進一步深入研究探討。本研究采用RT-PCR和免疫組織化學染色的方法分別從基因和蛋白質兩個水平檢測了Aurka在胃癌和癌旁組織中的表達，并結合患者的臨床資料和腫瘤病理學特征進行相關性分析，以闡明上述問題。
本組資料結果顯示，無論在基因還是蛋白質水平，胃癌組織中Aurka的表達均高于癌旁組織，從而驗證了它是一種致癌基因[23]的結論。在臨床工作中，胃癌的預后與分期相關，胃癌的TNM分期包含了腫瘤的浸潤深度與淋巴結轉移數目信息[13]。本組資料結果顯示，TNM分期為Ⅲ期、Ⅳ期者的Aurka mRNA的表達水平高于Ⅰ期、Ⅱ期者（P < 0.01）；T分期為T3期者的Aurka mRNA的表達水平高于T1期、T2期者（P < 0.01）；N分期為N2期、N3期者的Aurka mRNA的表達水平高于N0期、N1期者（P < 0.01），表明Aurka mRNA的表達與患者的淋巴結轉移數目、腫瘤浸潤深度及TNM分期均存在相關性。此外，胃癌的預后還與腫瘤的分化程度有關[32]，分化程度越低，其預后越差。本組資料結果表明，在低分化的胃癌患者中，Aurka mRNA的表達水平高于中分化+高分化者，差異有統計學意義（P < 0.01）。這與筆者前期的研究[33]結果不一致，可能與筆者前期的研究樣本量少有關。另外，筆者還發現，胃癌患者癌組織中Aurka基因的表達與其性別和年齡均無關，提示Aurka基因的表達無性別差異，也不會隨著年齡的增加而增減，且與腫瘤位置、術前CEA及CA19-9表達均不相關。據本組結果，推測Aurka基因可以作為評判胃癌患者預后的指標。
HP感染與胃癌的發生有一定關系[34-35]，是胃癌主要癌前疾病即慢性萎縮性胃炎的重要始動因素，并可導致慢性萎縮性胃炎→胃黏膜腸上皮化生→胃癌這一序貫事件的發生[36-37]。目前鮮見胃癌中HP感染與Aurka基因表達關系的報道。筆者對此進行了相關的研究和分析，結果表明，HP陽性胃癌患者的癌組織中Aurka基因的表達水平高于HP陰性者，差異有統計學意義（P < 0.01）。總之，Aurka基因在胃癌發生、發展過程中的作用機理，目前尚無一致結論，有待我們進一步的研究。
胃癌是世界范圍內常見的惡性腫瘤之一，其死亡率居惡性腫瘤的第二位[1]。在我國，胃癌發病率位于全國腫瘤登記地區惡性腫瘤的第二位（32.23/10萬），死亡率位于第三位（23.90/10萬）[2]。腫瘤細胞生長的無限性和浸潤轉移是惡性腫瘤的最重要的特征，其侵襲和轉移途徑多樣，且是胃癌治療失敗并造成死亡率居高不下的重要原因[3]。胃癌的發生和發展是一個多基因、多因素和多階段的復雜演變過程，涉及多種癌基因和抑癌基因[4]。極光激酶（Aurora kinases）是近年來發現的一種參與有絲分裂的新絲氨酸/蘇氨酸激酶，包括Aurora-A、Aurora-B及Aurora-C三個成員，其中Aurora-A即Aurka主要調節中心體和微管的功能，確保中心體的正確分離和胞漿的完整分裂[5]，其基因突變或過表達也會引起細胞癌變。在許多腫瘤組織中均發現Aurka的高表達，如：乳腺癌[6]、卵巢癌[7]、食管癌[8]、胃癌[9-11]及結腸癌[12]。Aurka在多種實體瘤組織中異常表達，與腫瘤的發生發展密切相關，因此探尋Aurka與胃癌的關系及其機制將有助于為胃癌的治療提供新的靶點。筆者采用實時熒光定量逆轉錄聚合酶鏈反應（RT-PCR）以及免疫組織化學染色的方法，檢測了胃癌組織及其癌旁組織中Aurka蛋白及其mRNA的表達，并探討了Aurka mRNA與患者臨床病理學特征的相關性，研究其與胃癌增殖、浸潤及轉移的關系，旨在判斷Aurka基因能否作為預后及復發的預測指標。
1 資料與方法
1.1 研究對象
回顧性收集2011年4月至2013年9月期間于川北醫學院附屬醫院胃腸外科接受手術的198例胃癌患者的手術標本，包括癌組織和癌旁組織（即距離癌組織以遠6 cm以上的胃黏膜組織），男155例，女43例；年齡31~79歲、（58.6±11.7）歲，其中 < 50歲57例，50~60歲（含50歲）46例，60~70歲（含60歲）58例，≥70歲37例。據NCCN 2012版胃癌TNM分期標準[13]：Ⅰ期57例，Ⅱ期31例，Ⅲ期72例，Ⅳ期38例；T1期38例，T2期40例，T3期120例。據NCCN 2012版胃癌淋巴結轉移分級標準[13]：N0期76例，N1期38例，N2期53例，N3期31例。所有患者均未發生遠處轉移（M0期）。腫瘤分化程度：高分化7例，中分化53例，低分化138例。腫瘤位置：上1/3者49例，中1/3者53例，下1/3者96例；癌胚抗原（CEA）陽性35例，陰性163例；CA19-9陽性38例，陰性160例。所有病例均經術前胃鏡活檢和術后病理學檢查證實為胃癌，且近期均未服用過抗幽門螺桿菌（Helicobacter pylori，HP）藥物或行放化療治療。
1.2 主要試劑與儀器
TRIzol購自天根生化科技（北京）有限公司，逆轉錄試劑盒及RT-PCR試劑盒均購自寶生物工程（大連）有限公司，免疫組織化學Aurka一抗（單克隆、兔抗人）及免疫組織化學二抗試劑盒均購自Abcam公司；DAB試劑盒購自北京中杉金橋生物技術有限公司。ABI 7900 TH定量PCR儀系ABI公司產品。
1.3 方法
1.3.1 HP檢測
14C-尿素呼吸試驗兼簡單、快速以及價廉于一體，靈敏度大于95%，特異度高于90%，為HP感染的一線診斷方法[14]。本組患者術前即采用14C-尿素呼吸試驗的方法檢測HP值，定義 < 100 dpm為陰性，≥100 dpm為陽性[15]。有42例患者因胃食管結合部完全梗阻而未做此項檢查。
1.3.2 RT-PCR方法檢測Aurka基因的表達
剪取一定量的組織，用液氮研成粉末后按比例加入TRIzol，按TRIzol說明書進行總RNA的提取，用焦炭酸二乙酯處理后的水（簡稱DEPC水）溶解RNA，并檢測RNA的質量。按照逆轉錄試劑盒說明書將RNA逆轉錄為cDNA。Aurka和β-actin基因引物由上海Invitrogen公司合成。引物序列、產物大小、反應體系及擴增條件見表 1。樣品目的基因的相對表達水平（relative quantitation，RQ）用△△CT方法計算，即RQ=2-△△CT，其中△△CT=（組織Aurka基因的CT值-組織Aurka管家基因的CT值）-（組織β-actin基因的CT值-組織β-actin管家基因的CT值）[4]。△△CT值越高，基因表達水平越低。
表1
引物序列和產物大小
1.4 免疫組織化學染色方法檢測Aurka蛋白的表達
將腫瘤組織及癌旁組織用35%甲醛固定，石蠟包埋，切烤片，依次置二甲苯溶液、無水乙醇、85%乙醇及75%乙醇中各5 min以進行脫蠟處理；以0.01 mol/L PBS溶液（pH=7.4）漂洗3次，每次5 min；采用3%過氧化氫溶液室溫避光封閉，再置入0.01 mol/L枸櫞酸溶液（pH=6.0）中進行高溫抗原修復；滴加Aurka一抗（1 : 150），將切片置于保濕盒內，4 ℃冰箱過夜，復溫后用PBS溶液沖洗；滴加二抗（1 : 150），37 ℃放置15 min；以DAB顯色，蘇木精復染，鹽酸乙醇分化，再以自來水沖洗藍化；最后吹干、封片。用非胃腫瘤患者的正常胃黏膜組織作為陽性對照，用PBS溶液代替一抗作為陰性對照[16]。
陽性標準：40倍鏡下隨機選取5個視野（最后選取均值），根據陽性細胞比例和染色強度分別進行半定量評分。染色強度：沒有被染色，0分；淺棕色（弱），1分；棕色（中），2分；深棕色（強），3分。陽性細胞比例：≤3%，0分；4%~25%，1分；26%~50%，2分；51%~75%，3分；≥75%，4分。將強度分數與比例分數相乘：0分，陰性；1~2分，弱陽性；3~5分，中度陽性；6~12分，強陽性[17]。弱陽性、中度陽性和強陽性為陽性。
1.5 統計學方法
采用SPSS 17.0統計學軟件進行數據分析。計量資料用均數±標準差（x±s）表示，胃癌與癌旁組織中的Aurka mRNA的表達水平比較采用配對t檢驗，Aurka蛋白的表達陽性率比較采用配對χ2檢驗。胃癌組織中Aurka mRNA的表達水平與臨床病理學特征的關系分析時，臨床病理學特征為二分類時采用成組t檢驗，為多分類時采用單因素方差分析（兩兩比較采用SNK法）。HP陽性胃癌患者和HP陰性胃癌患者的Aurka mRNA表達水平比較采用成組t檢驗。檢驗水準α=0.05。
2 結果
2.1 胃癌組織和癌旁組織中Aurka mRNA的表達水平
胃癌組織與癌旁組織中Aurka mRNA的表達水平分別為16.62±1.85和7.10±1.59，胃癌組織的Aurka mRNA的表達水平較高（t=-38.58，P < 0.05）。
2.2 胃癌組織和癌旁組織中Aurka蛋白的表達情況
胃癌組織中Aurka蛋白的表達陽性率為93.9%（186/198），高于癌旁組織的16.2%（32/198），差異有統計學意義（P < 0.01），見表 2和圖 1。
表2
胃癌組織及癌旁組織中Aurka蛋白的表達情況（例）
圖1
Aurka蛋白在胃癌組織和癌旁組織中的表達（SP ×200）。1A：在胃癌組織中表達呈陽性；1B：在癌旁組織中表達呈陰性
2.3 胃癌組織中的Aurka mRNA表達水平與患者HP值的關系
42例患者因賁門部完全梗阻未行14C-尿素呼吸試驗，故在做此項分析時將其除外，共156例患者測定了HP值，其中陽性84例，陰性72例。陽性患者胃癌組織中Aurka mRNA的表達水平為15.38±1.73，高于HP陰性患者的7.20±1.86，差異有統計學意義（t=-3.74，P < 0.01）。
2.4 胃癌組織中的Aurka mRNA表達水平與患者臨床病理學特征的關系
胃癌組織中Aurka mRNA的表達水平與性別、年齡、腫瘤位置、術前CEA和CA19-9表達均無關（P > 0.05），而與腫瘤TNM分期、T分期、N分期及分化程度均有關（P < 0.05），TNM分期為Ⅲ期、Ⅳ期者的Aurka mRNA的表達水平高于Ⅰ期、Ⅱ期者（P < 0.01）；T分期為T3期者的Aurka mRNA的表達水平高于T1期、T2期者（P < 0.01）；N分期為N2期、N3期者的Aurka mRNA的表達水平高于N0期、N1期者（P < 0.01）；低分化程度者的Aurka mRNA的表達水平高于中分化+高分化者（P < 0.01）。見表 3。
表3
胃癌組織中Aurka mRNA的表達水平與其臨床病理學特征的關系（x±s）
3 討論
人類Aurka蛋白的編碼基因位于20q13.2，全長DNA包含1 212 kb的開放閱讀框，其編碼一種分子量為46×103、由403個氨基酸組成的絲氨酸/蘇氨酸激酶[18]。Aurka基因從中心體復制到有絲分裂結束都定位在中心體上[19-20]。此外，Aurka基因還出現在中心體附近的微管區域[21]，具有調節中心體分離、成熟以及紡錘體裝配的功能，并且在調節細胞周期的G2/M期轉變以及檢測點方面均發揮重要的作用[22]。1998年，人類的Aurka基因首次從結腸癌中克隆，同時Aurka基因被確定為癌基因，因為過量表達的Aurka基因可以使裸鼠生瘤[12]。Aurka基因在較多癌組織和癌細胞系中也顯著性表達上調，原因包括基因擴增和轉譯增強兩個方面[23-24]。Sen等[25]首先發現了初級乳腺中Aurka基因的過表達，隨后的研究又發現在人類乳腺[6]、卵巢[7]、食管[8]及胃部[9-11]的腫瘤中Aurka基因均存在一定程度的過表達。
腫瘤形成是一系列基因突變累積的結果，在各種腫瘤細胞中普遍存在基因組不穩定的現象[26]，胃癌也一樣。腫瘤相關基因，包括癌基因、腫瘤抑制基因和穩定基因（如DNA修復基因）的突變都會造成基因組的不穩定[27]。根據已知的Aurka基因的細胞學功能，筆者推測，Aurka基因可能通過兩方面的功能參與腫瘤的形成：一是在有絲分裂過程中抑制胞質分裂，導致腫瘤基因組的不穩定性[28-29]；二是抑制細胞周期檢驗點，幫助基因組不穩定的細胞繼續復制，不斷進入有絲分裂，從而導致細胞惡性增殖[30]。研究[31]表明，在食管癌中，從胃上皮化生→腸上皮化生→低級別上皮內瘤變→高級別上皮內瘤變→巴氏腺癌→食管癌，食管黏膜組織中Aurka mRNA的表達水平逐漸升高，可見其表達變化貫穿食管組織癌變的全過程，在食管癌的發生發展過程中扮演著重要角色。而在胃癌中鮮見此方面的報道，如果能夠通過研究發現它與胃癌某些病理學特征的關系，那么術前的胃鏡下活檢將有助于對腫瘤的初步評估，以指導臨床治療。然而類似的研究卻很少。Aurka基因的表達與胃癌病理學特征及HP值是否有關，目前國內外鮮見相關研究；其與胃癌患者外周血CEA和CA19-9的表達，以及與患者性別和年齡的關系，目前國內外也鮮見報道，值得我們進一步深入研究探討。本研究采用RT-PCR和免疫組織化學染色的方法分別從基因和蛋白質兩個水平檢測了Aurka在胃癌和癌旁組織中的表達，并結合患者的臨床資料和腫瘤病理學特征進行相關性分析，以闡明上述問題。
本組資料結果顯示，無論在基因還是蛋白質水平，胃癌組織中Aurka的表達均高于癌旁組織，從而驗證了它是一種致癌基因[23]的結論。在臨床工作中，胃癌的預后與分期相關，胃癌的TNM分期包含了腫瘤的浸潤深度與淋巴結轉移數目信息[13]。本組資料結果顯示，TNM分期為Ⅲ期、Ⅳ期者的Aurka mRNA的表達水平高于Ⅰ期、Ⅱ期者（P < 0.01）；T分期為T3期者的Aurka mRNA的表達水平高于T1期、T2期者（P < 0.01）；N分期為N2期、N3期者的Aurka mRNA的表達水平高于N0期、N1期者（P < 0.01），表明Aurka mRNA的表達與患者的淋巴結轉移數目、腫瘤浸潤深度及TNM分期均存在相關性。此外，胃癌的預后還與腫瘤的分化程度有關[32]，分化程度越低，其預后越差。本組資料結果表明，在低分化的胃癌患者中，Aurka mRNA的表達水平高于中分化+高分化者，差異有統計學意義（P < 0.01）。這與筆者前期的研究[33]結果不一致，可能與筆者前期的研究樣本量少有關。另外，筆者還發現，胃癌患者癌組織中Aurka基因的表達與其性別和年齡均無關，提示Aurka基因的表達無性別差異，也不會隨著年齡的增加而增減，且與腫瘤位置、術前CEA及CA19-9表達均不相關。據本組結果，推測Aurka基因可以作為評判胃癌患者預后的指標。
HP感染與胃癌的發生有一定關系[34-35]，是胃癌主要癌前疾病即慢性萎縮性胃炎的重要始動因素，并可導致慢性萎縮性胃炎→胃黏膜腸上皮化生→胃癌這一序貫事件的發生[36-37]。目前鮮見胃癌中HP感染與Aurka基因表達關系的報道。筆者對此進行了相關的研究和分析，結果表明，HP陽性胃癌患者的癌組織中Aurka基因的表達水平高于HP陰性者，差異有統計學意義（P < 0.01）。總之，Aurka基因在胃癌發生、發展過程中的作用機理，目前尚無一致結論，有待我們進一步的研究。
