劉濤 1 , 陳艷芳 2 , 劉義 3
  • 四川大學華西醫院 1耳鼻咽喉科;2麻醉與危重急救研究實驗室,四川成都 610041;3廣東省云浮市人民醫院耳鼻喉科,廣東云浮 527300;
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目的:機械分離、培養小鼠耳蝸螺旋神經元,并進行免疫熒光細胞學鑒定,為后期進一步的實驗研究提供實驗材料。方法:采用初出生1~5天以內的昆明小鼠進行解剖、機械分離以獲得螺旋神經節組織,進行原代培養后,應用神經微絲蛋白(Neurofilament protein,NFP-H)單克隆抗體進行免疫熒光細胞學鑒定。結果:機械分離后獲得的螺旋神經節組織中的螺旋神經元,在體外培養條件下可以存活并進行正常分化。典型的螺旋神經元,其細胞形態呈橢圓形,胞體透明光滑、接近生理形態。熒光染色標記后,胞體和神經突起均顯色好,Schwann細胞和成纖維細胞未著色。結論:應用機械分離的方法獲得小鼠耳蝸螺旋神經節組織并進行培養,耳蝸螺旋神經元在體外可以穩定地存活生長。培養獲得的細胞形態和生存狀態接近生理狀態,滿足電生理、免疫細胞化學、藥理學等研究。應用特異性的神經微絲蛋白對培養獲得的螺旋神經元進行免疫熒光細胞學鑒定,特異性好,熒光顯色好。

引用本文: 劉濤,陳艷芳,劉義. 小鼠耳蝸螺旋神經元的原代培養及鑒定. 華西醫學, 2008, 23(1): 104-105. doi: 復制