目的 探討一種人高活性血管基質層細胞（stromal vascular fraction cells，SVFs）快速分離及熒光標記的有效方法，為SVFs 用于臨床奠定理論基礎。 方法 取植皮手術患者自愿捐贈的腹部皮下脂肪組織，分別用0.065%、0.125%、0.185% 3 種濃度的Ⅰ型膠原酶消化，提取SVFs。收集細胞懸液進行細胞計數，錐蟲藍染色計算細胞成活率。用1’ 雙十八烷-3， 3， 3’，3’- 四甲基吲哚羧化青- 高氯酸鹽（1，1’-dioctadecyl-3，3，3’，3’-2-tetramethy-lindocyanine perchlorate，DiI）熒光標記0.125% 濃度組SVFs，倒置熒光顯微鏡下觀察標記情況；將DiI 標記的SVFs 接種培養，倒置顯微鏡觀察細胞形態學變化，MTT 法檢測DiI 標記前后細胞增殖能力。 結果 0.065%、0.125% 及0.185% 濃度組SVFs 細胞總數分別為（138.68 ± 11.64）× 104、（183.80 ± 10.16）× 104、（293.07 ± 8.31）× 104 個，組間比較差異均有統計學意義（P lt; 0.01）；
細胞成活率分別為91% ± 2%、90% ± 2%、81% ± 2%，0.065%濃度組和0.125%濃度組均顯著高于0.185%濃度組（P lt; 0.01），0.065% 濃度組和0.125% 濃度組比較差異無統計學意義（P=0.881）。倒置熒光顯微鏡觀察示，0.125% 濃度組細胞均可被DiI 熒光標記，標記后的細胞膜完整，細胞質豐富，細胞形態正常，細胞核未染熒光；DiI 標記的SVFs 細胞懸液接種培養后，細胞能順利貼壁及傳代。MTT 法檢測示DiI 標記前后SVFs 細胞生長曲線相似，生長趨勢吻合。 結論 0.125% 濃度
的Ⅰ型膠原酶可有效消化脂肪中的膠原組織，獲取大量SVFs，同時對細胞損傷較小，是理想的工作濃度；DiI 可有效標記SVFs。
引用本文： 李力群,高建華,潘盛盛,倪彬婷. 人高活性血管基質層細胞快速分離及熒光標記的實驗研究. 中國修復重建外科雜志, 2012, 26(7): 861-864. doi: 復制