抗TAG-72抗原單鏈抗體的原核表達及對人肝癌的檢測_《中國普外基礎與臨床雜志》

作者：

徐宏勇 ¹ , 徐立 ² , 李開宗 ³ , 竇科峰 ³

【作者單位】1.解放軍第451醫院肝膽普外科（西安 710054）;;
2.第四軍醫大學西京醫院全軍消化病研究所（西安710032）;;
3.第四軍醫大學西京醫院肝膽外科（西安 710032）;

關鍵詞：

肝細胞癌單鏈抗體原核表達腫瘤相關糖蛋白-72抗原

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目的探討抗腫瘤相關糖蛋白-72(TAG-72)單鏈抗體的原核表達及與4種肝癌細胞系和肝癌組織的特異性親和力。
方法將抗TAG-72單鏈抗體的cDNA片段插入噬菌粒載體pCANTAB5E, 獲得噬菌粒載體TAG-72-scFv-pCANTAB5E。將后者轉化入E.coli HB2151, 經β, D異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)誘導表達獲得抗TAG-72單鏈抗體蛋白。采用細胞培養及免疫細胞/組織化學方法, 檢測4種肝癌細胞系及石蠟包埋的肝癌組織中TAG-72抗原的表達。
結果 SDS-PAGE及Western blot法證實, 抗TAG-72單鏈抗體蛋白分子得以正確表達。抗TAG-72單鏈抗體可與肝癌細胞系SMMC7721、HepG2和HHCC結合, 表明這3種細胞表達了特異性腫瘤抗原; 抗TAG-72單鏈抗體不能結合BEL7402細胞。40例肝癌組織中TAG-72抗原表達陽性率Ⅰ期、Ⅱ~Ⅲ期分別為23.08%(3/13)和62.96%(17/27),在正常肝組織標本中無TAG-72抗原表達,TAG-72抗原在正常肝組織及肝癌組織中表達的差異有統計學意義(P lt;0.05)。
結論 TAG-72抗原在肝癌細胞或肝癌組織中有特異性表達，有可能成為判斷肝癌的標志物。

引用本文： 徐宏勇,徐立,李開宗,竇科峰. 抗TAG-72抗原單鏈抗體的原核表達及對人肝癌的檢測. 中國普外基礎與臨床雜志, 2010, 17(7): 699-702. doi: 復制

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抗TAG-72抗原單鏈抗體的原核表達及對人肝癌的檢測

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