目的探討周圍神經體外預變性的新方法，以便在短期內獲得大量高效雪旺細胞，以期為組織工程神經構建提供大量種子細胞。 方法采用轉綠色熒光蛋白基因C57BL/6小鼠的骨髓源性細胞（bone marrow derived cells，BMDCs）與C57BL/6小鼠坐骨神經體外共培養，建立體外預變性模型的實驗組（A組），無BMDCs參與的單純坐骨神經體外培養為對照組（B組）。培養7 d后行大體觀察及免疫熒光染色觀察BMDCs能否在體外進入坐骨神經內參與預變性；將變性后的神經酶消化行雪旺細胞培養，通過細胞免疫熒光染色及流式細胞儀檢測各組細胞量及鑒定原代培養后的雪旺細胞純度，評價各組雪旺細胞增殖情況。 結果培養7 d后大體觀察示兩組坐骨神經斷端開始形成神經瘤樣結構，A組較B組明顯；免疫熒光染色示A組大量BMDCs浸潤至神經內部，其中部分細胞表達F4/80，為單核巨噬系統細胞。經細胞培養，A、B組獲得的雪旺細胞產量分別為（5.59 ± 0.19）× 104個/mg和（3.20 ± 0.21） × 104個/mg，差異有統計學意義（t=2.14，P=0.03）。細胞接種后48 h經p75NTR熒光染色鑒定示，兩組可見雙極或三極樣雪旺細胞，細胞核為藍色且較小，胞體為紅色；成纖維細胞呈扁平多角形，細胞核及核仁清晰，大而不透光，多位于雪旺細胞下且p75NTR染色為陰性。A組混雜的成纖維細胞較少，B組較多。A、B組雪旺細胞純度分別為88.4% ± 5.8%和76.1% ± 3.7%，差異有統計學意義（t=2.38，P=0.04）。經流式細胞儀定量分析A組雪旺細胞純度為89.6%，B組為74.9%。 結論BMDCs與周圍神經體外共培養是一種有效獲得大量雪旺細胞的方法，為組織工程神經構建中種子細胞的獲取提供了新方法。
目的 探討自體骨-前交叉韌帶(ACL)-骨、同種異體骨-ACL-骨移植的形態學、組織學及超微結構的變化特點. 方法 將日本大耳白兔和新西蘭兔各60只隨機分成自體骨-ACL-骨移植組和二步冷凍保存同種異體骨-ACL-骨移植組,每組分別有兩種兔各30只,對照組為自體正常側ACL.術中及術后均不使用免疫抑制劑.術后4、12周分別切取ACL作大體、組織學和電鏡檢測. 結果 自體移植組重塑型速率要快于二步冷凍保存同種異體骨-ACL-骨移植組.4周時自體移植組和冷凍異體移植組前交叉韌帶的膠原纖維中大直徑纖維(≥80 nm)分別為6%、24%,小直徑纖維(＜80 nm)分別為94%、76%.12周時前交叉韌帶的膠原纖維中大直徑纖維(≥80 nm)分別為0%、2%,小直徑纖維(＜80 nm)分別為100%、98%,電鏡下可見自體、冷凍異體移植組重塑過程均相似.光鏡下兩者有相似的組織學愈合過程. 結論 自體骨-ACL-骨移植和二步冷凍保存同種異體骨-ACL-骨移植,具有相似重塑型過程和組織學愈合過程,自體移植組重塑形速率要快于二步冷凍保存同種異體骨-ACL-骨移植組.
目的 尋求更佳的關節軟骨冷凍保存方法。方法 設計兩步冷凍法中的不同浸泡時間 ,對新西蘭兔的關節軟骨進行冷凍保存。軟骨取材后 ,隨機分成五組 , 組為新鮮對照組 , ～ 組為冷凍組 ,冷凍前先在4℃ 10 % DMSO中浸泡 30分鐘 ( 組 )、1小時 ( 組 )、2小時 ( 組 )及 4小時 ( 組 ) ,然后均置超低溫冰箱中以- 1℃ / min的速度降溫至 - 6 0℃ ,維持 1小時后 ,投入液氮中保存 1周。復溫后行透射電鏡檢查、臺盼藍染色、軟骨細胞培養 3H- Td R摻入率測定。結果 1軟骨組織冷凍后 ,軟骨細胞均受到不同程度的損傷。 組活細胞率96 % ,3H- Td R摻入率為 (4 95 3.13± 5 83.2 7) % , ～ 組與之比較 ,有非常顯著性差異 (Plt;0 .0 1)。 組超微結構完全正常 ,而 ～ 組均顯示細胞器損傷。 2 組的細胞結構和功能最佳 ,電鏡檢查僅見輕度細胞器損傷 ,活細胞率為 5 6 % ,3H- Td R摻入率 (1139.88± 146 .39) % ; 、 、 組與之比較 ,有非常顯著性差異 (Plt;0 .0 1)。結論 關節軟骨在冷凍之.，先浸泡4℃10 % DMSO中2小時，可提高軟骨細胞的存活率。
目的 綜述BMP-6的成骨機制和成骨效應，為其進一步研究提供參考。 方法 廣泛查閱近年國內外有關BMP-6成骨機制及其在動物實驗中成骨效應的文獻，并進行歸納總結。 結果 BMP-6由骨基質產生，通過Smad蛋白信號轉導途徑將成骨信號轉導至BMSCs，誘導其向成骨、成軟骨方向分化，并在骨和軟骨的發育成熟過程中起重要作用；BMP-6還與多種骨病（如骨折、骨質疏松、骨腫瘤）有密切關系。 結論 對BMP-6的深入研究有望為臨床治療骨折不愈合、骨關節炎、骨質疏松癥等相關骨病提供一條新途徑。
目的探討體外轉染人IGF-1（human IGF-1，hIGF-1）基因腺病毒載體（Ad-hIGF-1）對TNF-α誘導的兔椎間盤髓核細胞凋亡的影響。 方法取8只健康成年家兔（雌雄不限，體重2.0～2.5 kg）椎間盤髓核，以Ⅱ型膠原酶消化法分離培養髓核細胞。取第2代對數生長期髓核細胞，根據培養條件不同分為3組。空白組：以含10%PBS的DMEM/F12培養基培養；TNF-α組：在空白組培養基中加入100 ng/mL TNF-α；Ad-hIGF-1組：在TNF-α組培養基中加入感染復數為50的Ad-hIGF-1。熒光顯微鏡下觀察Ad-hIGF-1組病毒轉染情況。各組培養48 h后，行RT-PCR及Western blot檢測hIGF-1 mRNA和蛋白表達，TUNEL法及流式細胞儀檢測細胞凋亡情況。 結果熒光顯微鏡下觀察示，Ad-hIGF-1組細胞發出綠色熒光，提示轉染成功。RT-PCR及Western blot檢測示，Ad-hIGF-1組可見hIGF-1 mRNA及蛋白表達條帶，而空白組和TNF-α組均未見。TUNEL法檢測示，TNF-α組、Ad-hIGF-1組及空白組細胞凋亡率分別為34.24% ± 4.60%、6.59% ± 1.03%、0.40% ± 0.15%；流式細胞儀檢測示，TNF-α組、Ad-hIGF-1組、空白組早期凋亡率分別為22.16% ± 2.69%、5.03% ± 0.96%、0.49% ± 0.05%，晚期凋亡率分別為13.96% ± 4.86%、10.68% ± 3.42%、0.29% ± 0.06%；以上檢測指標TNF-α組均顯著高于空白組、Ad-hIGF-1組（P lt; 0.05），Ad-hIGF-1組高于空白組，差異均有統計學意義（P lt; 0.05）。 結論hIGF-1基因對TNF-α體外誘導的兔髓核細胞凋亡有抑制作用。
目的比較經皮椎體成形術（percutaneous vertebroplasty，PVP）和經皮椎體后凸成形術（percutaneous kyphoplasty，PKP）治療絕經后女性T12、L1椎體骨質疏松性壓縮性骨折術后對鄰近腰椎體骨密度的影響。 方法2008年1月－2011年6月收治符合選擇標準的T12、L1骨質疏松性壓縮性骨折患者59例，根據采用手術方法不同隨機分為PVP組（29例）和PKP組（30例）。兩組患者年齡、絕經時間、病程、致傷原因、骨折椎體、骨折分度等一般資料比較，差異均無統計學意義（P gt; 0.05）。于術前、術后1周和末次隨訪時測量手術區域后凸Cobb角；于圍手術期及末次隨訪時測量患者手術區域下位腰椎（L5除外）骨密度值、股骨頸骨密度值及體重指數（body mass index，BMI），了解抗骨質疏松情況；并應用FRAX在線工具評價兩組患者未來10年主要骨質疏松性骨折和髖部骨折的概率。結果兩組患者均獲隨訪，隨訪時間12～48個月，平均25.5個月。兩組末次隨訪時T12、L1后凸Cobb角與術前比較差異均有統計學意義（P lt; 0.05）；術后1周及末次隨訪時PKP組Cobb角顯著小于PVP組（P lt; 0.05）。兩組組間及組內圍手術期、末次隨訪時BMI比較差異均無統計學意義（P gt; 0.05）。兩組末次隨訪時下腰椎骨密度及其T值均較圍手術期顯著改善（P lt; 0.05）；兩組間圍手術期下腰椎骨密度及其T值比較差異無統計學意義（P gt; 0.05），末次隨訪時兩組間差異有統計學意義（P lt; 0.05）。兩組間及組內圍手術期、末次隨訪時股骨頸骨密度及其T值比較差異均無統計學意義（P gt; 0.05）。骨折風險評估：兩組間及組內圍手術期、末次隨訪時主要骨質疏松性骨折和髖部骨折的概率比較差異均無統計學意義（P gt; 0.05）。 結論經PVP和PKP治療1年以上未繼發骨折的T12、L1節段骨質疏松性壓縮性骨折患者，術后鄰近腰椎骨密度的增加提高了其椎體強度，遠期鄰近腰椎骨折發生率較低，且PKP相對于PVP，更有助于提高鄰近腰椎骨密度。
目的 觀察前交叉韌帶（anterior cruciate ligament，ACL）重建中不同直徑骨隧道對移植韌帶止點轉歸的影響。 方法 日本大耳兔90 只，雌雄不拘，體重2.5 ～ 3.0 kg，隨機分為3 組，每組30 只。制備ACL 止點轉歸動物模型，分成移植韌帶直徑（d）與骨隧道直徑（D）之比（d/D）為1/1 組（A 組）、1/1.5 組（B 組）和1/2 組（C 組）。觀察術后一般情況，并于術后4、8 和16 周每組處死10 只動物，行移植止點大體、組織學觀察及最大抗拉力載荷實驗。 結 果 3 組動物術后傷口愈合佳。平均雙下肢行走時間：A 組1.5 d、B 組2.0 d 及C 組3.5 d。大體觀察：術后4 周，A、B 組骨隧道口軟組織生長多于C 組；8 周A、B 組骨隧道口已無縫隙，C 組無改善；16 周A、B 組與正常韌帶止點相同，C 組未形成止點結構。組織學觀察：術后4 周各組肌腱與骨隧道間充滿疏松結締組織；8 周A、B 組潮線結構不連續，C 組未見潮線樣結構；16 周A、B組出現連續潮線樣結構，C組仍未形成潮線樣結構。術后4 周，A、B及C組最大抗拉力載荷分別為（75.44 ± 7.06）、（91.37 ±6.14）和（126.91 ± 4.61） N；8 周為（74.31 ± 4.81）、（88.30 ± 7.46）和（124.34 ± 8.44） N；16 周為（62.20 ± 5.32）、（71.53 ±5.99）和（83.62 ± 5.69） N；術后各時間點A、B 組間最大抗拉力載荷差異無統計學意義（P gt; 0.05），A、B 組與C 組間差異有統計學意義（P lt; 0.01）。 結論 在ACL 重建中d/D 為1/1.5 時，對止點轉歸無明顯影響，但d/D 小于此范圍將影響移植物止點的轉歸。
目的對下腰椎椎前自主神經叢進行解剖觀察，了解該區域自主神經叢的形態、位置特點，為下腰椎前入路手術中自主神經的保護提供解剖學依據。 方法對19具成人尸體標本進行解剖觀測，男15例、女4例；年齡44～78歲，平均64歲。確定腹中線（胸骨上窩中點和恥骨聯合中點的連線）后，觀察腹主動脈叢（abdominal aortic plexus，AAP）、腸系膜下叢（inferior mesenteric plexus，IMP）、上腹下叢（superior hypogastric plexus，SHP）的走行、其神經纖維的分布特點及其與腹中線的位置關系。 結果AAP、IMP主要呈網狀分布于腹主動脈前方，兩神經叢的神經纖維在腹主動脈左側較右側更加密集。SHP主干形態變異較大，分為4種類型。SHP主干長度為（59.38±12.86）mm、寬度（11.25±2.92）mm。SHP主干主要位于腹中線左側（10具，52.6%）、下腰椎前（13具，68.4%），主干向下延續為左、右腹下神經。 結論行下腰椎前入路手術時，可以考慮從椎體右側進行顯露，將自主神經和血管作為一整體移動，不必單獨分離解剖神經叢，從而最大限度避免神經損傷。
目的探討帶旋髂深血管蒂髂骨瓣植入治療FicatⅡ、Ⅲ期股骨頭缺血性壞死（avascular necrosis of femoral head，ANFH）的遠期療效。 方法回顧分析2000年10月-2006年2月，采用帶旋髂深血管蒂髂骨瓣植入術治療并獲隨訪的FicatⅡ、Ⅲ期ANFH 32例（43髖）。其中男27例（38髖），女5例（5髖）；年齡21~52歲，平均36.6歲。病因：激素性8例（11髖），酒精性18例（23髖），特發性6例（9髖）。病程2~52個月，平均8.2個月。依照骨壞死Ficat分期標準：Ⅱ期26髖，Ⅲ期17髖。術前患髖Harris功能評分（Harris hip score，HHS）為（68.2±8.4）分。依據手術前后HHS評分變化和X線片改變進行臨床療效評價和影像學評價。 結果術后切口均Ⅰ期愈合。除2例發生大腿前外側皮膚麻木外，無其他手術相關并發癥發生。4例（6髖）失訪，其余患者獲隨訪，隨訪時間98~187個月，平均129.3個月。5例（6髖）術后癥狀無緩解或加重，8~69個月時進展至Ⅳ期，行人工全髖關節置換術；余23例（31髖）未行進一步髖部手術；股骨頭10年生存率83.78%（31/37）。末次隨訪時，23例（31髖）HHS評分為（86.7±9.0）分，與術前比較差異有統計學意義（t=-48.313，P=0.000）；獲優9髖、良13髖、可9髖；治療成功率75.68%（28/37）。影像學檢查示6~8周植骨區開始骨重建跡象，成骨后股骨頭密度逐漸變均勻。至末次隨訪時5髖Ficat Ⅱ期進展至Ⅲ期，3髖Ficat Ⅱ期進展至Ⅳ期，3髖Ficat Ⅲ期進展至Ⅳ期；余26髖外形完整，Shenton線基本連續，關節間隙亦未見明顯狹窄，影像學成功率為70.27%（26/37）。 結論帶旋髂深血管蒂髂骨瓣植入治療FicatⅡ、Ⅲ期ANFH，能夠實現良好的成骨和血管重建作用，遠期療效滿意。
目的探討帶肌腹血供的腓骨長肌腱移植重建前交叉韌帶（anterior cruciate ligament，ACL）對止點轉歸的影響。方法將 80 只健康新西蘭大白兔隨機分成兩組（n=40），制備 ACL 損傷模型后，分別采用帶肌腹血供（A 組）和不帶肌腹血供（B 組）的自體腓骨長肌腱重建 ACL。術后觀察動物存活及切口愈合等一般情況；4、8、16 周取材行大體及組織學觀察；8、16 周行移植物生物力學測試，記錄最大抗拉強度及 ACL 止點斷裂率。結果兩組動物均存活至實驗完成。大體觀察示重建術后隨時間延長，A 組骨隧道與移植物緊密結合，血管浸潤豐富，至 16 周時已無明顯分界；而 B 組腱-骨間仍存在明顯分界。組織學觀察顯示，A 組腱-骨之間膠原纖維逐漸增多，形成致密纖維連接，至 16 周時形成類似正常 ACL 止點的“潮線”結構；而 B 組結構不明顯。生物力學測試顯示，術后 8、16 周 A、B 組 ACL 止點斷裂率比較，差異均無統計學意義（P=0.680；P=0.590）；但 A 組最大抗拉強度顯著優于 B 組，差異均有統計學意義（t=18.503，P=0.001；t=25.391，P=0.001）。結論帶肌腹血供的腓骨長肌腱移植重建兔 ACL 對其止點轉歸具有明顯促進作用，進而提高重建效果。