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貴陽市體檢人群癌胚抗原95%參考范圍的確定

目的　制定貴陽市體檢人群癌胚抗原95%參考范圍。 方法　回顧性統計分析2010年1月－12月2 112例健康體檢人群的癌胚抗原濃度。 結果　癌胚抗原95%參考范圍為≤4.56 ng/mL，無性別差異，40歲以上人群有明顯增高。 結論　貴陽市體檢人群癌胚抗原95%參考范圍應確定為≤4.56 ng/mL，結果報告可結合不同年齡段相應的參考范圍。擴大樣本量可提高研究結果的準確性、實用性。

乙型肝炎表面抗原陽性肝硬化患者前S1抗原、e抗原及乙型肝炎病毒DNA結果分析

目的　探討乙型肝炎病毒（HBV）表面抗原（HBsAg）陽性肝硬化患者血清中HBV前S1抗原(前S1抗原)、HBV e抗原（HBeAg）及HBV核酸定量檢測（HBV DNA）相關性。 方法　2008年7月－2011年5月對97例HBsAg陽性肝硬化住院患者和50份HBsAg陰性的健康體檢者血清進行前S1抗原、HBV血清標志物檢測及實時熒光定量PCR檢測HBV DNA結果進行分析。 結果　97份HBsAg陽性肝硬化患者血清中，前S1抗原、HBeAg及HBV DNA陽性率分別為53.6%（52/97）、22.7%（22/97）及61.8%（60/97）。22例HBeAg陽性血清中，前S1抗原陽性18例（81.8%）， HBV DNA陽性20例（90.9%)。75例HBeAg陰性血清中，前S1抗原陽性34例（45.3%），HBV DNA陽性40例（53.3%），兩者的前S1抗原與HBV DNA結果間都具有很好的相關性。HBV DNA含量與前S1抗原及HBeAg陽性結果顯示：HBsAg陽性的肝硬化患者血清中HBV DNA陰性率為38.1%（含量＜103 copies/mL），而陽性檢出率HBV DNA含量主要集中在103～105 copies/mL，占81.7%（49/60），HBV DNA含量＞105 copies/mL占18.3%（11/60）。 結論　HBsAg陽性的肝硬化患者血清中主要以HBV非HBeAg陽性血清學模式為主，HBV DNA陽性檢出率的含量主要集中在103～105 copies/mL。前S1抗原在HBeAg陽性血清中與其含有HBsAg病毒及HBeAg陽性患者具有很好的相關性，而在HBeAg陰性血清中存在著差異。Objective　To study the correlation among Pre-S1 antigen, HBeAg and HBV DNA results in patients with HBsAg-positive liver cirrhosis. Methods　We retrospectively analyzed the serum pre-S1-antigen, HBV serum markers and real-time quantitative PCR HBV DNA results in 97 patients with HBsAg-positive liver cirrhosis and 50 HBsAg-negative healthy volunteers in our hospital from July 2008 to May 2011. Results　Among the 97 samples of HBsAg-positive liver cirrhosis patients’ serum, the positive rates of Pre-S1 antigen, HBeAg and HBV DNA were 53.6% (52/97), 22.7% (22/97) and 61.8% (60/97), respectively. In the 22 samples of HBeAg-positive serum, the number of positive pre-S1 antigen and HBV DNA was 18 (81.8%) and 20, respectively. In the 75 samples of negative HBeAg serum, the number of positive pre-S1 antigen and HBV DNA was 34 (45.3%) and 40 (53.3%) respectively. The pre-S1 antigen was correlated well with HBV DNA results in both the two groups. HBV DNA level, pre-S1 antigen and HBeAg-positive results showed that the serum HBV DNA negative rate of HBsAg-positive patients with cirrhosis was 38.1% (＜103 copies/mL), while the positive rate of HBV DNA level was mainly concentrated at 103~105 copies/mL, accounting for 81.7% (49/60), and HBV DNA level over 105 copies/mLaccounted for only 18.3% (11/60). Conclusions　HBsAg-positive patients with cirrhosis mainly have a serum non-HBeAg-positive HBV serology pattern, and HBV DNA positive rate of the content is mainly concentrated at 103~105 copies/mL. There is a good correlation between pre-S1 antigen in HBeAg-positive serum and patients with HBsAg virus or positive HBeAg, while for Pre-S1 antigen in HBeAg-negative serum, it is quite different.

葡萄糖轉運蛋白Ⅰ型與腫瘤增殖細胞核抗原在卵巢上皮性腫瘤中的表達及意義

【摘要】　目的　探討葡萄糖轉運蛋白Ⅰ型（glucose transporter 1，GLUT1）和腫瘤增殖細胞核抗原Ki-67在卵巢上皮性腫瘤組織中的表達及其臨床意義。　方法　收集2000年1月-2008年6月不同卵巢上皮性腫瘤病變患者119例的組織標本，采用免疫組織化學SP二步法檢測腫瘤組織中GLUT1和Ki-67的表達情況。　結果　卵巢交界性、惡性上皮性腫瘤灶性或廣泛高表達GLUT1和Ki-67，其表達強度有差異。卵巢良性上皮性腫瘤不表達GLUT1和Ki-67。在卵巢癌中GLUT1及Ki-67的表達強度與病理分級、臨床分期、預后有關。GLUT1表達強度與病理分型無關，Ki-67表達強度與病理分型有關。　結論　卵巢上皮性腫瘤組織中GLUT1和Ki-67的表達具有相關性，其表達強度與腫瘤的良惡性質和增殖狀態有關，二者同時檢測可以全面了解卵巢上皮性腫瘤的性質、卵巢癌惡性程度和生物學行為，對于判斷腫瘤的性質和預后有一定價值。【Abstract】　Objective　To investigate the expression and clinical significance of glucose transporter-1 (GLUT1) and tumor proliferating karyon antigen Ki-67 in epithelial ovarian tumor tissue.　Methods　Immunohistochemistry SP method was used to detect the expression of GLUT1 and Ki-67 protein in epithelial ovarian tumor tissues from 119 patients diagnosed in our hospital from January 2000 to June 2008.　Results　The expressions of GLUT1 and Ki-67 had local or abroad higher expressions in the borderline and malignant epithelial ovarian tumor, and the expressive intensity was different. In benign tumors, the expression was negative. The expressive intensity of GLUT1 and Ki-67 had correlation with the grade, stage, and prognosis in malignant tumors. The expressive intensity of GLUT1 had no correlation with the type of malignant tumors, while Ki-67 related to the pathological types.　Conclusion　The expressions of GLUT1 and Ki-67 have relativity. The expressive intensity of GLUT1 and Ki-67 relates to the character and proliferation of epithelial ovarian tumors. The combined detection GLUT1 and Ki-67 is helpful to know the character of epithelial ovarian tumors, the malignant degree and biologic behavior of ovarian carcinoma, which is useful in estimating the character and prognosis of epithelial ovarian tumors.

表達乙肝病毒preS2S蛋白的荷瘤小鼠模型的建立

目的：建立能表達乙肝病毒（hepatitis B virus,HBV）preS2S抗原蛋白的荷瘤小鼠模型，為研究HBV核酸疫苗的體內CTL應答及免疫治療作用提供簡便易行的研究模型。 方法：以免疫印跡法驗證SP2/0-S2S細胞中有HBV preS2S抗原的穩定表達，將SP2/0-S2S細胞種植到BALB/c小鼠脅部皮下（荷瘤），觀察能否生長成瘤，以及成瘤的時間、腫瘤大小和荷瘤后小鼠的生存時間；以免疫組織化學法檢測小鼠腫瘤組織HBV preS2S抗原的表達。以不表達preS2S抗原蛋白的SP2/0-CMV細胞荷瘤小鼠作為陰性對照。結果：荷瘤后3天～1周，SP2/0-S2S細胞可在小鼠皮下形成實體腫瘤，成瘤率為100%，腫瘤細胞中有preS2S抗原表達，荷瘤后小鼠的平均生存時間為16±1天；與不表達preS2S抗原蛋白的SP2/0-CMV細胞荷瘤小鼠相比，成瘤率、成瘤時間、腫瘤大小及生存時間差異。結論：建立了能表達HBV preS2S抗原蛋白的荷瘤小鼠模型，可用于HBV核酸疫苗的體內CTL應答及免疫治療作用的實驗研究。同時也建立了不表達preS2S抗原蛋白的荷瘤小鼠模型，可用作陰性對照。

CTLA4-Ig融合蛋白誘導獼猴同種異體肝移植免疫耐受的實驗研究

目的 探討細胞毒性T淋巴細胞相關抗原4（CTLA4Ig）融合蛋白對同種異體肝臟移植免疫耐受的誘導作用及機理。方法 利用大型哺乳動物獼猴作為研究對象，建立同種異體原位肝臟移植模型。同種異體原位肝臟移植對照組及CTLA4-Ig組各5只。觀察術后生存時間，檢測肝功能、IL-2、IL-10、排斥反應的病理學分級和術后肝臟細胞凋亡指數。結果 對照組平均存活時間為6.57 d，CTLA4-Ig組平均存活時間為14.92 d (Plt;0.05)。肝功能變化: 對照組術后ALT明顯升高，Alb則明顯降低; CTLA4-Ig組ALT及Alb均維持于正常穩定水平。細胞因子變化： 術后3 d起，對照組循環血中IL-2表達水平相對較高，而CTLA4-Ig組IL-10的表達水平較對照組高。移植物病理排斥反應分級: 在移植術后CTLA4-Ig組排斥反應程度明顯比對照組輕。對照組術后3 d起肝臟細胞凋亡指數較CTLA4-Ig組明顯升高。結論 CTLA4-Ig融合蛋白可誘導移植后免疫耐受，延長受體生存時間。細胞因子IL-2或者IL-10可作為監測移植排斥反應或者免疫耐受的實驗室指標之一。

大鼠肝癌發生發展過程中肝組織增殖細胞核抗原動態演變規律

目的　研究原發性肝細胞癌發生、發展過程中肝組織增殖細胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen, PCNA）的動態演變規律。方法　將60只SD大鼠按隨機數字表法隨機分為對照組（20只）和實驗組（40只）。用化學致癌劑3,3′-二氨基聯苯胺（3，3′-diaminobenzidine,DAB）誘發SD大鼠肝癌，采用免疫組織化學方法連續監測各時相肝組織中PCNA的表達，光鏡下觀察肝組織的病理變化。結果　本實驗的誘癌過程可分為炎性變期、增生纖維化期和癌變期3個階段； PCNA的表達最早出現于炎性變早期匯管區的卵圓細胞中，并在匯管區呈區域性過表達分布； 炎性變中期，PCNA表達陽性率達高峰，隨后下降，在癌變期又升高，在整個病理演變過程中其表達具波動性。結論　在致癌因素的存在下，PCNA首先表達于卵圓細胞； PCNA表達的動態演變對肝癌的發生有一定的預警作用。

血清CEA、CA242、CA19-9及其聯檢對大腸癌的診斷價值

血清HBeAg狀態對肝細胞癌患者術后生存的影響

目的　研究肝癌患者血清HBeAg狀態對肝癌切除術后復發及生存的影響。方法　收集1999~2005年在我科行根治性切除的223例腫瘤直徑≤3 cm的肝癌患者的資料。根據患者術前血清HBeAg狀態，分為HBeAg陽性組（n=73）和HBeAg陰性組（n=150），比較2組患者無瘤生存率（DFS）和總體生存率（OS），并分析影響DFS和OS的危險因素。結果　HBeAg陽性和HBeAg陰性患者的1、3、5年的OS分別為91.5%、76.8%、60.1%和95.2%、85.3%、73.2%（P=0.053）； 1、3、5年DFS分別為73.3%、53.7%、40.3%和86.6%、65.5%、54.5%（P=0.002）。與HBeAg陰性組比較，HBeAg陽性組患者年齡較輕（P=0.004），肝硬變較重（P=0.008），而在腫瘤因素及手術相關因素方面2組間的差異無統計學意義（P＞0.05）。對DFS和OS的多因素分析顯示，年齡＞50歲、HBeAg陽性和大結節肝硬變是影響OS的獨立危險因素，而HBeAg陽性和多發腫瘤是影響DFS的獨立危險因素。結論　小肝癌患者術后HBeAg陽性患者較HBeAg陰性者更易早期復發，而且總體生存較差。

胃癌細胞增殖與腹腔灌洗液中端粒酶活性及腹膜轉移的相關性研究

目的研究胃癌增殖細胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen，PCNA)表達與腹腔灌洗液端粒酶活性及腹膜轉移的相關性，并比較腹腔灌洗液中端粒酶活性和細胞學檢測游離癌細胞預測腹膜轉移的應用價值。方法應用免疫組化SP法檢測60例胃癌患者胃癌組織中PCNA表達,PCRTRAPELISA法檢測腹腔灌洗液中端粒酶活性,同時行腹腔灌洗液脫落細胞學(peritoneal lavage cytology,PLC)檢測； 并分析其與相關臨床病理因素的關系。結果胃癌患者腹腔灌洗液中端粒酶活性的陽性率為41.7%； 與漿膜侵犯、組織學類型、浸潤深度、漿膜受累面積及腹膜轉移密切相關，并隨著浸潤深度及漿膜受累面積的增加而升高(P＜0.05)。PLC檢測陽性率為25.0%； 在伴肉眼可見腹膜轉移灶(P1～3)者明顯增高，也隨著浸潤深度及漿膜受累面積的增加而升高。兩種方法檢測的陽性率總體上差異無統計學意義，但在未分化型癌、pT4、伴肉眼可見腹膜轉移灶(P1～3)者端粒酶活性陽性率明顯高于PLC。PCNA增殖指數（PI）在腹腔灌洗液端粒酶活性表達陽性者明顯高于表達陰性者，伴肉眼可見腹膜轉移灶(P1～3)者明顯高于無肉眼可見腹膜轉移灶（P0）者，漿膜受侵者明顯高于漿膜未受侵者（P均＜0.05）。結論兩種方法均適用于胃癌腹腔脫落癌細胞的診斷或腹膜轉移的預測，端粒酶活性檢測微量癌細胞的靈敏度優于PLC法檢測； 胃癌端粒酶活性與惡性增殖活性密切相關； 胃癌高增殖活性是漿膜受侵及腹膜轉移的重要原因。

CTLA4- Ig抗大鼠肝移植排斥反應及誘導免疫耐受的實驗研究

【摘要】目的 建立大鼠原位肝移植（ROLT）急性排斥反應模型，探討細胞毒淋巴細胞抗原4免疫球蛋白（CTLA4Ig）抗排斥反應和誘導免疫耐受的作用。 方法 采用“二袖套管”法建立Wistar→SD大鼠配對組合的肝移植后排斥反應模型，并于術后第2天腹腔內一次性注射CTLA4Ig（75 μg/只大鼠），與未給藥的相同組合的排斥反應模型鼠對照研究，觀察移植術后7 d 2組動物的一般情況、肝功能變化、移植肝病理改變及血清TNFα水平的變化，同時觀察CTLA4Ig組動物術后4個月時的上述情況，以了解CTLA4Ig抗排斥及誘導免疫耐受的作用。 結果 ①對照組動物于肝移植術后6～14 d內相繼死亡； 移植肝出現明顯的排斥反應的病理改變征象。 ②CTLA4Ig組動物于術后7 d及4個月均未見明顯的排斥反應表現，移植肝無明顯的排斥反應的病理改變征象，血清TNFα、ALT、AST、TBIL及DBIL水平均明顯低于對照組（P＜0.05），TP及Alb水平則明顯高于對照組（P＜0.05）。 結論 CTLA4Ig有抗排斥反應及誘導免疫耐受功能的作用； 血清TNFα水平作為觀察ROLT后排斥反應的指標，可能有一定的參考價值。