目的 構建小鼠甲狀腺轉錄因子-2（TTF-2）轉基因動物表達載體（pBROAD3-TTF-2），觀察其在小鼠骨髓間充質干細胞（BMSC）中的表達。 方法 從C57BL/6J小鼠肝臟組織中提取基因組DNA，利用聚合酶鏈式反應方法擴增出TTF-2基因1 113 bp開放閱讀框，通過DNA重組技術將TTF-2基因片段插入克隆載體pMD18-T中，經測序正確后，再重組于pBROAD3-mcs中，構建轉基因動物表達載體pBROAD3-TTF-2，用酶切電泳分析對其進行鑒定。運用脂質體轉染試劑將其轉染BMSC后，蛋白質印跡法檢測TTF-2基因的表達。 結果 ① DNA測序證實目的基因序列正確無突變，酶切電泳分析得到相應的目的片段，大小與理論計算值一致，成功構建轉基因動物表達載體pBROAD3-TTF-2。② 蛋白質印跡法顯示轉染的BMSC高表達TTF-2蛋白。 結論 成功構建了pBROAD3- TTF-2轉基因動物表達載體，顯示其轉染BMSC后TTF-2基因的表達，為下一步建立TTF-2轉基因小鼠模型奠定了基礎。