目的探討新型光遺傳學工具Channelrhodopsin-XXM2.0(XXM2.0)、Channelrhodopsin-PsCatCh2.0(PsCatCh2.0)的光敏感性及動力學特征,分析其是否可用于光遺傳學視覺功能的恢復。方法通過分子生物學技術將XXM2.0和PsCatCh2.0的基因片段連接到包含抗氨芐青霉素篩選基因和報告基因的載體pCIG(c)-msFoxn3上,形成新質粒pCIG(c)-msFoxn3-XXM2.0、pCIG(c)-msFoxn3-PsCatCh2.0。將構建的新質粒轉染到HEK 293T細胞上,用HEKA膜片鉗系統行全細胞模式記錄對光反應。在2.7×1016、4.7×1015、6.4×1014 photons/(cm2·s)的光強下記錄電流大小;在2.7×1016 photons/(cm2·s)光強下刺激XXM2.0、PsCatCh2.0并讓其充分恢復,在Clampfit 10.6軟件中分析開放和關閉時間常數;在相同光強下,設置2~32 Hz的光脈沖刺激,記錄XXM2.0、PsCatCh2.0的響應情況,并在重復光刺激后間隔4000 ms和200 ms來分析電流衰減情況。組間比較均采用獨立樣本t檢驗。結果在XXM2.0、PsCatCh2.0序列兩端引入限制性內切酶位點EcoRⅠ和EcoRⅤ,酶切后通過T4 DNA連接酶成功構建新質粒pCIG(c)-msFoxn3-XXM2.0和pCIG(c)-msFoxn3-PsCatCh2.0,并轉染表達在HEK 293T細胞上。XXM2.0和PsCatCh2.0均表現出光強依賴性,光強越大電流越大。在視網膜安全閾值內的光強6.4×1014 photons/(cm2·s)刺激下,XXM2.0和PsCatCh2.0仍產生較大電流,分別為(92.8±142.0)、(13.9±5.6)pA;兩者比較,差異無統計學意義(t=1.24、1.24,P=0.28、0.29)。XXM2.0、PsCatCh2.0的開放時間常數分別為(23.9±6.7)、(2.4±0.8)ms,關閉時間常數分別為(5 803.0±568.2)、(219.9±25.6)ms;兩者比較,XXM2.0開放時間常數、關閉時間常數均較PsCatCh2.0大,差異均有統計學意義(t=7.10、31.60,P=0.00、0.00)。在響應頻率方面,XXM2.0和PsCatCh2.0均能很好地響應32 Hz的高頻率脈沖光刺激,并在較長時間(4000 ms)和較短時間(200 ms)間隔的重復光刺激后均保持較小的電流衰減率。結論XXM2.0和PsCatCh2.0均可在對視網膜安全的光強條件下被激活,并都能以較低的電流衰減來響應高頻率(至少32 Hz)的脈沖光刺激,均滿足利用光遺傳學來恢復視覺功能所需的光敏蛋白特性。
目的基于生物信息學方法構建肺腺癌(lung adenocarcinoma,LUAD)特異性長鏈非編碼RNA(long non-coding RNA,lncRNA)相關的競爭性內源性RNA(competing endogenous RNA,ceRNA)調控網絡,并分析AFAP1-AS1在LUAD中的功能機制,以期為LUAD治療靶點研究提供新的方向。方法從基因表達綜合性基因庫(GEO)中下載LUAD的基因芯片,并使用GEO2R在線軟件篩選LUAD與正常組織之間具有差異表達的lncRNA和mRNA,并通過在線數據庫預測其靶基因,構建ceRNA網絡,并進行富集分析。在細胞實驗中,對AFAP1-AS1進行基因敲除并構建siRNA,通過細胞轉染法轉染LUAD細胞A549。用CCK8、Transwell、劃痕實驗和流式細胞術實驗檢測細胞增殖、侵襲、遷移和凋亡的能力。結果在LUAD的芯片中共鑒定出6個差異表達lncRNA 和494個差異表達的mRNA。ceRNA 網絡共涉及6個lncRNA、22個miRNA和55個mRNA。富集分析發現mRNA與癌癥相關通路有關。在細胞實驗中,敲除AFAP1-AS1可抑制細胞增殖、侵襲和遷移,且AFAP1-AS1促進細胞凋亡。結論本研究構建了一個lncRNA介導的ceRNA網絡,這可能有助于進一步研究LUAD的作用機制。此外,通過細胞實驗,本研究發現AFAP1-AS1有潛力作為LUAD的治療靶點。
目的系統評價Stanford A 型主動脈夾層術后譫妄(postoperative delirium,POD)的危險因素。方法計算機檢索中國知網(CNKI)、中國生物醫學文獻數據庫(SinoMed)、萬方數據庫(Wangfang data)、維普數據庫(VIP)、PubMed、Web of Science、EMbase 及The Cochrane Library,收集有關Stanford A 型主動脈夾層術后譫妄危險因素的病例對照研究、隊列研究,檢索時限從建庫至2022年9月。由2名研究者獨立進行文獻篩選、資料提取和質量評價,采用RevMan 5.4軟件和Stata 15.0軟件進行Meta分析。結果共納入21篇文獻,包括3 385例Stanford A型主動脈夾層患者,Meta分析結果顯示,年齡[MD=2.58,95%CI(1.44,3.72),P<0.000 01]、男性[OR=1.33,95%CI(1.12,1.59),P=0.001]、飲酒[OR=1.45,95%CI(1.04,2.04),P=0.03]、糖尿病史[OR=1.44,95%CI(1.12,1.85),P=0.005]、術前白細胞[MD=1.17, 95%CI(0.57,1.77),P=0.000 1]、手術時間[MD=21.82,95%CI(5.84,37.80),P=0.007]、深低溫停循環時間[MD=3.02,95%CI(1.04,5.01),P=0.003]、主動脈阻斷時間[MD=8.94,95%CI(2.91,14.97),P=0.004]、體外循環時間[MD=13.92,95%CI(5.92,21.91),P=0.000 6]、ICU時間[MD=2.77,95%CI(1.55,3.99),P<0.000 01]、住院時間[MD=3.50,95%CI(1.75,5.25),P<0.0001]、APACHE Ⅱ評分[MD=2.76,95%CI(1.59,3.93),P<0.000 01]、機械通氣時間[MD=6.10,95%CI(3.48,8.72),P<0.000 01]、低氧血癥[OR=2.32,95%CI(1.40,3.82),P=0.001]、術后最低氧合指數[MD=?96.53,95%CI(?105.44,?87.61),P<0.000 01]、血氧飽和度[MD=?3.50,95%CI(?4.49,?2.51),P<0.000 01]、術后血紅蛋白[MD=?6.52,95%CI(?10.15,?2.89),P=0.000 4]、術后血乳酸[MD=0.45,95%CI(?0.15,0.75),P=0.004]、術后電解質紊亂[OR=5.86,95%CI(3.42,10.04),P<0.000 01]、急性腎損傷[OR=1.92,95%CI(1.34,2.75),P=0.000 4]、術后體溫[MD=0.79,95%CI(0.69,0.88),P<0.000 01]是Stanford A 型主動脈夾層術后譫妄的危險因素。結論現有證據表明,年齡、男性、飲酒史、糖尿病史、術前白細胞、手術時間、深低溫停循環時間、主動脈阻斷時間、體外循環時間、ICU時間、住院時間、APACHE Ⅱ評分、機械通氣時間、低氧血癥、術后血乳酸、術后電解質紊亂、急性腎損傷及術后體溫是Stanford A 型主動脈夾層術后譫妄的危險因素,氧合指數、血氧飽和度及血紅蛋白數為Stanford A 型主動脈夾層術后譫妄的保護性因素。
目的通過合并現有證據,闡明氣腔播散(spread through air spaces,STAS)陽性在肺葉切除或亞肺葉切除的早期非小細胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者中的預后意義,及亞肺葉切除相比肺葉切除是否會在STAS陽性的Ⅰ~Ⅲ期NSCLC患者人群中造成更差的預后,同時探究冰凍切片指導STAS潛在陽性人群切除術式的可靠性。 方法計算機檢索PubMed、EMbase、The Cochrane Library、Web of Science 數據庫中文獻,通過納入不同手術方式與STAS陽性的Ⅰ~Ⅲ期NSCLC患者預后關系的研究,以及研究通過冰凍切片識別STAS準確度的文獻,檢索時限為建庫至2022年7月。并使用PRISMA(Preferred Reporting Items for Systematic Reviews and Meta-Analyses)指南對上述研究進行評價。 結果納入了24項STAS相關研究,共12 558例患者,其中11篇直接比較了肺葉切除和亞肺葉切除對STAS陽性人群術后生存的影響。Meta分析顯示,STAS的存在無論對接受葉切還是亞葉切的患者而言均為預后不利因素[RFS:HR=2.27,95%CI(1.96,2.63),P=0.01;OS:HR=2.08,95%CI(1.74,2.49),P=0.07],而在STAS陽性患者中,肺葉切除相比亞肺葉切除可帶來更大的生存優勢(RFS:HR=1.97,95%CI(1.59,2.44),P=0.02;OS:HR=1.91,95%CI(1.47,2.48),P=0.08]。在納入4篇探究術中冰凍切片識別STAS準確性的研究后,靈敏度合并值為55%[95%CI(45%,64%)],特異度合并值為92%[95%CI(77%,97%)],而合并后曲線下面積為0.68[95%CI(0.64,0.72)]。 結論本研究證實STAS陽性是早期NSCLC患者術后的重要危險因素之一,且肺葉切除相比亞肺葉切除對于STAS陽性患者而言可帶來更大的生存獲益,因此當術中快速冰凍提示STAS陽性時,應首選肺葉切除作為根治術式。術中冰凍切片識別STAS的特異度較高,可對術中術式的選擇提供一定的參考,但由于其敏感性及準確性較低,還需要探索其他更為靈敏的檢測方式用以指導外科決策。
目的 評估增強型體外反搏治療(enhanced external counterpulsation,EECP)對慢性心力衰竭患者運動能力和生活質量的影響。方法 計算機檢索 PubMed、The Cochrane Library、EMbase、CNKI、Wanfang Data、VIP 和 CBM 數據庫,手工檢索文獻補充,檢索時限為2010年1月1日—2022年10月1日。根據研究納入標準篩選標題、摘要和全文文章:研究心力衰竭患者EECP干預的隨機對照試驗。采用 RevMan 5.3 軟件進行 Meta 分析。結果 共納入 19項隨機對照試驗。EECP誘導可顯著改善6分鐘步行距離[OR=57.37,95%CI(40.89 ,70.85),P<0.001],對左心室射血分數有益[OR=0.85,95%CI(0.55 ,1.14),P<0.001],B型利鈉肽明顯下降[OR=?0.67,95%CI(?1.09,?0.25),P=0.002],左室舒張末期內徑明顯縮小[OR=-7.77,95%CI(?11.49,?4.04),P<0.001],左室收縮末期收縮功能增強[OR=?8.53,95%CI(?13.47 ,?3.60),P<0.001],明尼蘇達州心功能不全生命質量評分表評分提示已改善患者的生活質量[OR=16.34,95%CI(0.59 ,32.10),P=0.04]。 結論 盡管存在異質性和偏倚風險,本研究證實,EECP可以提高心力衰竭患者的運動能力、改善心力衰竭患者生活質量。但仍需要更多、更大規模的設計良好的隨機對照試驗。
目的 系統分析并比較國內外胸外科醫學模擬教育研究文獻,為我國胸外科醫學模擬教育未來發展提供思路。方法 采用詞頻與聚類分析法,以CiteSpace可視化軟件、Excel統計軟件為工具,從PubMed、CNKI數據庫檢索國內外胸外科醫學模擬教育文獻,進行可視化和統計分析。結果 共納入國內外胸外科醫學模擬教育文獻2 491篇。國外年發文量呈上升趨勢;發文量前三的國家是美國(583篇)、加拿大(108篇)、德國(58篇);cardiac surgery、medical knowledge、medical education為國外胸外科醫學模擬領域的研究熱點, lung cancer、surgical training、3d printing目前仍處于爆發期中。國內年發文量增長緩慢,目前的核心研究主題為腔鏡模擬訓練器、情景模擬教學法、標準化病人和虛擬現實模型。結論 國內胸外科醫學模擬教育相對國外起步較晚、發展慢。應借鑒國外發展經驗,采用新技術,緊跟前沿,關注非技術性崗位勝任力培養,不斷完善課程體系。
惡性黑色素瘤是一種高度惡性的黑色素細胞腫瘤,好發于皮膚、黏膜處,原發或繼發于乳腺的較為罕見。本文報道1例胸壁皮膚惡性黑色素瘤伴乳腺轉移的病例,患者出生時即發現胸前區皮膚色素斑,病程長達50年,臨床表現極不典型;4個月余前彩色超聲發現左乳12點新發結節,誤診為纖維腺瘤而行微創手術,術后病理提示惡性黑色素瘤。筆者結合此案例,詳細探討了此類不典型惡性黑色素瘤的診斷和治療,為臨床提供可借鑒的經驗。
目的比較吲哚菁綠熒光法(indocyanine green)與改良膨脹萎陷法(inflation deflation)在胸腔鏡解剖性肺段切除術應用中圍手術期指標,以評價其有效性與安全性。方法 計算機搜索中國知網、萬方數據知識服務平臺、中國生物醫學文獻數據庫、Web of science、Cochrane Library、EMbase、PubMed、Clinicaltrials.gov,收集有關胸腔鏡肺段切除術中吲哚菁綠熒光法及改良膨脹-萎陷法對照研究的相關文獻,搜索時間為2000年1月1日—2023年5月1日,應用Stata14MP、RevMan5.4對符合納入標準的文獻數據進行Meta分析。結果 共納入10篇文獻、包括1 156例患者。胸腔鏡解剖性肺段切除術中吲哚菁綠熒光法的安全性及有效性優于改良膨脹萎陷法,其術后總并發癥發生率降低[OR=0.51,95%CI(0.36,0.71),P<0.0001]、術后肺漏氣發生率降低[OR=0.50,95%CI(0.31,0.80),P=0.007)、手術時間縮短[MD=?25.81,95%CI(?29.78,?21.84),P<0.00001]、術后住院時間縮短[MD= ?0.98,95%CI(?1.57,?0.39),P=0.001]、段間交界線清晰顯示率升高[OR=5.79,95%CI(2.76,12.15),P<0.00001],差異均有統計學意義。結論 對比改良膨脹萎陷法,吲哚菁綠熒光法可以快速、清晰地顯示段間交界線,降低手術難度,縮短手術時間和住院時間,降低并發癥發生率,為靶肺段精確切除提供有力的技術支持,是一種安全有效的方法,值得在臨床上積極推廣應用。