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        find Author "ZHANG Shaoqiang." 1 results
        • Lentivirus-mediated siRNA Targeting Cyclooxygenase-2 Gene Inhibits Human Laryngocarcinoma Cells Proliferation and Invasion

          目的 構建沉默環氧化酶-2(COX-2)基因重組慢病毒,觀察其體外侵襲的抑制作用,從而探討干擾COX-2抑制喉癌細胞增殖的作用機理,為喉癌的治療提供新的思路。 方法 逆轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)檢測COX-2基因在人表皮樣喉癌細胞(Hep-2)中的表達情況。利用上海吉凱公司RNA干擾(RNAi)慢病毒表達載體系統,構建針對COX-2基因慢病毒RNAi表達載體。轉染Hep-2細胞,干擾COX-2基因的表達,實時定量PCR檢測干擾前后基因表達變化。利用生長曲線測定干擾載體轉染前后細胞生長速度變化。流式細胞儀檢測細胞的生長周期。Boyden侵襲小室法測定體外侵襲力。 結果 成功構建了COX-2慢病毒RNAi表達載體,并建立了干擾COX-2基因的Hep-2細胞系。實時定量PCR檢測COX-2基因在Hep-2細胞系中過表達被顯著抑制。生長曲線測定,COX-2基因干擾后細胞增殖明顯變慢。流式細胞儀檢測細胞的生長周期可見干擾組誘導Hep-2細胞凋亡,轉染G0~G1期細胞數量明顯上升,S期細胞減少,表明siRNA干擾Hep-2細胞后,細胞由G0~G1期進入到S期受到阻滯,細胞增殖速度下降。體外侵襲實驗中,Hep-2-AS侵襲細胞數(31.0 ± 1.8)顯著低于Hep-2細胞(104.0 ± 2.6)及Hep-2-P細胞(99.0 ± 2.7),差異有統計學意義(P<0.05)。 結論 喉癌中過表達的COX-2基因被干擾后表達明顯降低并顯著抑制細胞的生長速度和侵襲能力。同時驗證了COX-2基因RNA干擾在進行抗腫瘤的治療中潛在的應用前景。

          Release date:2016-09-07 02:34 Export PDF Favorites Scan
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