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        find Keyword "copper chaperone for SOD1" 1 results
        • Application of siRNA Technology to Silence Copper Chaperone for SOD1 Gene in Human Umbilical Vein Endothelial Cells

          目的 采用RNA干擾技術沉默CCS(copper chaperone for SOD1)基因,構建相關小干擾RNA(siRNA),探索出針對CCS的高效siRNA序列。 方法 合成用于人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)細胞中沉默CCS基因的siRNA。應用脂質體轉染的方法在HUVEC細胞中對CCS基因進行RNA沉默。蛋白免疫印跡Western blotting檢測沉默前后CCS蛋白表達變化的情況,甲基四唑藍法MTT檢測轉染前后細胞活力。最后用單因素方差分析對數據進行統計學分析,以確定有效的siRNA序列。 結果 轉染前后細胞形態無肉眼可見變化,轉染后細胞活力分別為98.5%和98.8%。CCS蛋白沉默率分別為63.7%和61.4%。 結論 采用siCCS-2和siCCS-3序列轉染條件對HUVEC細胞活力損傷小,CCS沉默效率高,實驗條件穩定,重復性好。為我們繼續研究沉默CCS后抑制血管內皮細胞的生長增殖、血管形成提供了穩定的實驗基礎。

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