• 蘇州大學附屬第二醫院骨科(江蘇蘇州,215004);
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目的 探討不同部位取材分離純化雪旺細胞(Schwann cells,SCs)的純度、活性以及數量差異,為神經缺損修復提供優質、足量種子細胞奠定理論基礎。 方法 6 只5 日齡SD 大鼠,雌雄不限,體重8 ~ 10 g;切取背根神經節(實驗組)和坐骨神經(對照組)。采用聯合酶消化加機械吹打法分離培養SCs,并進行純化及傳代培養。取第1 代SCs,用計數法繪制8 d 內SCs 生長曲線,MTT 法檢測8 d 內SCs 增殖情況,抗S-100 免疫細胞化學檢測SCs 純度,ELISA 法檢測腦源性神經營養因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)濃度。 結果 每只大鼠可切取背根神經節36 ~ 43 個。消化成單個細胞后計數,實驗組可獲取(7.5 ± 0.6)× 106 個SCs,對照組可獲取(3.5 ± 0.4)× 106 個SCs,差異有統計學意義(t=13.175,P=0.000)。兩組SCs 第3 天開始進入對數增長期,隨培養時間延長,細胞數及細胞增殖吸光度(A)值均呈上升趨勢;且培養3、4、5、6 d 時,實驗組細胞數及A 值明顯高于對照組,差異均有統計學意義(P  lt; 0.05)。經S-100 免疫細胞化學檢測,實驗組SCs 純度為92.08% ± 3.45%,對照組為77.50% ± 3.57%,差異有統計學意義(t=6.869,P=0.001)。ELISA法檢測示實驗組培養3 d 和5 d 時BDNF 濃度均高于對照組,差異有統計學意義(P  lt; 0.05)。 結 論 與坐骨神經相比,取材于背根神經節能獲得數量更多、純度和活性更高的SCs,為神經損傷修復創造了必要條件。

引用本文: 王世清,范志海,沈憶新. 不同部位取材的雪旺細胞培養與純化研究. 中國修復重建外科雜志, 2011, 25(2): 166-170. doi: 復制