目的 探討核心結合因子α1(core-binding factor α1,Cbfa1)對骨髓間充質干細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成骨定向分化的作用。方法 抽取3月齡日本大白兔股骨骨髓,密度梯度離心獲得MSCs,以Cbfa1重組腺病毒轉染第3代MSCs,3 d后免疫熒光法觀察目的基因的表達,并于1~7 d MTT法檢測其對細胞增殖的影響(Cbfa1腺病毒處理組)。以正常培養組、單純誘導組和對照腺病毒處理組作為對照,各組設置7、14 d兩個時間點進行觀察。RT-PCR法半定量分析Cbfa1腺病毒處理對MSCs堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨鈣素(osteocalcin,OC)、骨橋蛋白(osteopontin,OPN)和I型膠原等多種成骨細胞標志基因的影響,同時觀察Cbfa1對MSCs成脂、成肌分化指標過氧化物酶體增殖物激活受體γ2和生肌決定因子的影響。結果 免疫熒光顯示,轉染Cbfa1重組腺病毒后MSCs可以表達Cbfa1;②各組MSCs增殖差異無統計學意義(P gt;0.05);③RT-PCR顯示7、14 d,Cbfa1腺病毒處理組ALP、OC和OPN的表達均明顯上調,Ⅰ型膠原的表達基本不變;④Cofa1使PPARγ、MyoD的表達受到抑制。結論 Cbfa1能明顯促進MSCs成骨方向的分化。
引用本文: 董世武,應大君,段小軍,朱楚洪,劉光久,糜建紅. 核心結合因子α1對骨髓間充質干細胞成骨細胞標志基因表達的影響. 中國修復重建外科雜志, 2005, 19(9): 746-750. doi: 復制