目的 利用 Red 同源重組的方法構建大腸桿菌外膜蛋白 A （outer membrane protein-A，OmpA）基因缺失株，為后續研究奠定一定的基礎。 方法 以已知大腸桿菌 OmpA 為靶點在其兩端設計同源臂引物，以質粒 pKD3 為模板利用聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction，PCR）擴增出氯霉素篩選標記序列，然后采用 Red 重組技術利用質粒 pKD46 誘導表達的重組酶通過電擊的方法把外源構建打靶片段導入大腸桿菌，構建大腸桿菌 OmpA 基因缺失突變株。以菌落 PCR 方法檢測基因大小，以蛋白質印跡法檢測蛋白表達情況，以重組菌株培養過程的吸光度（A600 ）值來反映重組子的生長情況。 結果 成功構建了大腸桿菌 OmpA 基因缺失突變株，通過蛋白質印跡法檢測和細菌生長曲線測定，發現 OmpA 基因成功完全丟失，突變株的生長曲線與野生型的差異不顯著。 結論 OmpA 基因缺失對大腸桿菌的生長無顯著影響，為進一步研究疫苗活載體提供了一定基礎。