目的 Ⅱ型膠原蛋白是軟骨細胞表達的特征性蛋白，隨著軟骨細胞的不斷傳代培養，Ⅱ型膠原蛋白表達逐漸減少。通過觀察Ⅱ型膠原蛋白對去分化兔關節軟骨細胞再分化的作用，為軟骨細胞更好地應用于軟骨組織工程奠定實驗基礎。 方法 無菌條件下取7 月齡新西蘭大耳白兔雙側膝關節分離培養軟骨細胞，體外單層傳代培養至第7 代，分別為P1、P2、P3、P4、P5、P6、P7。采用RT-PCR、實時定量PCR、1，9 二甲基亞甲藍（1，9-dimethylmethylene blue，DMMB）法檢測其表型維持情況。根據觀察結果，選擇去分化的軟骨細胞（P7），并給予不同濃度（0、0.5%、1.0%、1.5%）Ⅱ型膠原蛋白刺激。采用RT-PCR 及實時定量PCR 檢測各濃度組去分化軟骨細胞再分化的程度，DMMB 法檢測糖胺聚糖分泌情況。 結果 P1 ～ P7 細胞糖胺聚糖含量分別為（12.20 ± 0.17）、（11.20 ± 0.24）、（11.18 ± 0.16）、（10.89 ± 0.50）、（8.73 ± 0.19）、（9.39 ± 0.32）、（8.18 ± 0.20）μg，P2、P3、P4 間細胞糖胺聚糖含量比較，差異均無統計學意義（P gt; 0.05）；其余各代次細胞糖胺聚糖含量比較，差異均有統計學意義（P lt; 0.05）。P4、P5、P6、P7 Ⅰ、Ⅱ型膠原及蛋白聚糖mRNA 均有表達，其中P4 ～ P7 間Ⅰ型膠原mRNA 表達比較，差異無統計學意義（P gt; 0.05）；Ⅱ型膠原及蛋白聚糖比較，差異均有統計學意義（P lt; 0.05）。0、0.5%、1.0%、1.5%濃度組的P7 軟骨細胞糖胺聚糖含量分別為（8.20 ± 0.16）、（14.61 ± 0.33）、（13.93 ± 0.25）、（19.59 ± 0.46）μg，組間比較差異均有統計學意義（P lt; 0.05）。隨著Ⅱ型膠原蛋白濃度的升高，各濃度組細胞Ⅱ型膠原和蛋白聚糖mRNA 表達逐漸增強，Ⅰ型膠原表達減弱；不同濃度組中Ⅰ、Ⅱ型膠原及蛋白聚糖mRNA 表達比較，差異均有統計學意義（P lt; 0.05）。 結論 Ⅱ型膠原蛋白可促進兔去分化軟骨細胞再分化與活化。