目的 制備載銀羥基磷灰石(hydroxyapatite/Ag,HA/Ag)復合涂層,并探討其體外抗菌性能及生物相容性。 方法 采用真空等離子體噴涂技術于鈦合金(Ti-6Al-4V)基體表面制備HA/Ag 復合涂層(銀質量百分比為3%)。HA/Ag 復合涂層及HA 涂層分別于2% TBS 金黃色葡萄球菌及銅綠假單胞菌液培養2、4、7 d 后取出,激光掃描共聚焦顯微鏡觀察兩種涂層表面生物被膜形成情況,計算生物被膜細菌密度及活菌百分比;掃描電鏡觀察涂層生物被膜微觀形態;MTT 法檢測細胞毒性及急性溶血實驗評價涂層生物相容性。 結果 培養2 d,HA/Ag 復合涂層表面金黃色葡萄球菌及銅綠假單胞菌生物被膜厚度與HA 涂層比較差異無統計學意義(P gt; 0.05);培養4、7 d,均較HA 涂層明顯減小(P lt;0.01)。生物被膜細菌密度隨時間延長而增多,培養2、4、7 d,兩種涂層間比較差異無統計學意義(Pgt; 0.05)。培養2、4、7 d,HA/Ag 復合涂層表面金黃色葡萄球菌及銅綠假單胞菌生物被膜活菌百分比均較HA 涂層明顯減小(P lt; 0.01)。MTT法測定示兩種涂層材料毒性分級均為0 級,急性溶血實驗示HA/Ag 復合涂層及HA 涂層材料溶血率分別為0.19% 及0.12%。 結 論 HA/Ag 復合涂層有良好的生物相容性,對金黃色葡萄球菌及銅綠假單胞菌有明顯抗菌作用,無明顯細胞毒性和紅細胞破壞性,可用于骨科金屬植入材料表面提高其骨整合及抗菌性能。
目的探討通過構建材料表面微納結構聯合涂覆抗菌肽提升鈦金屬抗菌性能的可行性。方法取鈦片進行噴砂酸蝕(sandblasted large-grit acid-etched,SLA)及堿熱處理(alkali-heat treatment,AHT),構建微納結構;然后表面旋涂 10、30、50、70、90 μg 抗菌肽聚合物。掃描電鏡觀察處理前后鈦片表面形貌,能譜儀分析表面 C、N、O、Ti 4 種元素含量比例。將表面載有不同量抗菌肽聚合物的鈦片與金黃色葡萄球菌液共培養,24 h 后觀察抑菌圈形成情況,并測量抑菌圈直徑。另將處理前、SLA 處理、SLA+ AHT 處理、載有 90 μg 抗菌肽聚合物的鈦片分別與金黃色葡萄球菌以及大腸桿菌共培養,3 h 后掃描電鏡觀察兩種細菌在材料表面的黏附情況,3、6、9、12、24 h 測量菌液吸光度(A)值,評價鈦片抗菌效果。結果掃描電鏡下觀察,SLA+AHT 處理鈦片表面構建包含微米及納米級孔洞的多級結構;旋涂抗菌肽聚合物后表面孔徑<200 nm 的孔洞幾乎已被覆蓋。元素分析顯示,隨著抗菌肽聚合物旋涂量的增加,C 元素含量不斷增加;但直至含量達 70 μg 時才檢測到 N 元素。培養 24 h 后,載有不同量抗菌肽聚合物鈦片周圍均出現明顯抑菌圈,其中 90 μg 鈦片大于其余鈦片,比較差異均有統計學意義(P<0.05)。抗菌實驗結果顯示,載抗菌肽聚合物的鈦片表面細菌黏附量較其余鈦片明顯減少,菌液A 值明顯降低,比較差異有統計學意義(P<0.05)。結論通過在材料表面制備微納結構并涂覆抗菌肽,可賦予鈦金屬表面優良的抗菌性能。
目的探究以酚胺交聯涂層接枝氯己定(chlorhexidine,CHX)制備純鈦表面的理化性能,并評價改性后材料體外抗菌性及成骨細胞相容性。方法純鈦經過堿熱處理(對照組)后,浸泡于表沒食子兒茶素沒食子酸酯與己二胺混合液,表面沉積酚胺涂層(涂層組),再將其浸泡于CHX溶液,制得CHX接枝表面(接枝組)。掃描電鏡觀察樣品表面形貌、X射線光電子能譜儀分析表面元素組成、水接觸角測量分析表面親水性;活/死細菌染色、濁度法、抑菌環實驗評價抗菌性能;通過MTT法和細胞熒光染色評價細胞毒性;細菌-MC3T3‐E1細胞共培養評價有菌環境中細胞黏附能力。結果掃描電鏡觀察示涂層組和接枝組材料表面沉積物依次增加,逐漸覆蓋孔隙;X射線光電子能譜儀分析示接枝組N1s峰增強并出現Cl2p特征峰;水接觸角測量顯示對照組、涂層組、接枝組親水角依次增加且組間差異有統計學意義(P<0.05)。活/死細菌染色示接枝組表面黏附細菌最少且死細菌比例高,僅接枝組周圍有透亮的抑菌環,其培養體系菌液吸光度(A)值未顯著增加,且顯著低于對照組和涂層組(P<0.05)。MTT和細胞熒光染色結果示接枝組表面黏附細胞最少,但黏附細胞具有良好的增殖活性。細菌-細胞共培養顯示僅接枝組表面無細菌且有形態良好的活細胞黏附。結論酚胺交聯/CHX抗菌涂層具有抑制細菌黏附與增殖的能力,并在有菌環境中有效保障細胞黏附與增殖。