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        華西醫學期刊出版社
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        找到 作者 包含"李逸松" 1條結果
        • 體外血管內皮細胞和脂肪干細胞聯合培養對脂肪干細胞成骨分化的影響

          目的 進一步研究血管內皮細胞(vascular endothelial cells,VECs)和脂肪干細胞(adipose-derived stromal cells,ADSCs)聯合培養對ADSCs 成骨分化的影響,為聯合培養VECs 和ADSCs 作為骨組織工程種子細胞的可能性提供實驗依據。 方法 分別自足月妊娠SD 大鼠和18 周齡SD 大鼠制備臍血來源的VECs 和ADSCs,行形態學觀察及免疫熒光染色鑒定。取第3 代ADSCs 與誘導培養6 周的VECs 按細胞比例分別為3 ∶ 1、1 ∶ 1 和1 ∶ 3 設為實驗組A、B、C 組,ADSCs、VECs 單獨培養設為對照組D、E 組。培養第7、14 天取各組細胞行ALP 和飽和茜素紅鈣染色,進行ALP 和骨鈣定性檢測;第4、7、14 天定量測定各組細胞ALP 和骨鈣素(osteocalcin,OC)含量。 結果 誘導培養6 周的臍血來源VECs 可見短梭形和多角形細胞混合生長,免疫熒光染色可見血管性血友病因子為陽性。ADSCs 培養可見貼壁單個核細胞形態單一,呈梭形生長,無重疊現象;免疫熒光染色可見CD90+。各組細胞培養第7 天,ALP 染色示A、D、E 組呈陰性反應,B、C 組可見部分陽性細胞;第14 天時D、E 組仍呈陰性反應,A、B、C 組可見片狀陽性細胞。培養第7 天,茜素紅染色示各組均未發現紅色陽性細胞;第14 天時A、B、C 組可見極少數陽性細胞,D、E 組未發現陽性細胞。各組ALP 含量隨時間延長均逐漸增高,其中B 組各時間點含量均最高,與其余各組比較差異均有統計學意義(P lt; 0.01),各時間點A、C 組與D、E 組比較差異均有統計學意義(P lt; 0.01),A、C 組間及D、E 組間比較差異無統計學意義(P gt; 0.05)。各組OC 含量隨時間延長逐漸增高,培養第7、14 天時B 組含量最高,各時間點B 組與其余各組比較差異均有統計學意義(P lt; 0.01),第4、14 天時C、D 組間比較差異均有統計學意義(P lt; 0.01),第14 天時A、C 組和E 組比較差異有統計學意義(P lt; 0.05),其余各時間點各組間比較差異均無統計學意義(P gt; 0.05)。 結論 大鼠臍血來源的VECs 能在體外誘導ADSCs 向成骨細胞方向分化,1 ∶ 1 比例分化能力最強。

          發表時間:2016-08-31 05:47 導出 下載 收藏 掃碼
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