進入21世紀以來,肝移植已經成為治療終末期肝臟疾病、急性暴發性肝功能衰竭的一種最有效的選擇。據美國UNOS報道,在過去10年中,全世界已實施26 040例肝移植; 在先進的移植中心,肝移植受者的1年和3年存活率分別達到90%和80%,5年存活率達65%~75%,兒童肝移植和親屬活體肝移植存活率更高,除了存活時間延長外,生活質量得到明顯改善,包括恢復工作和生育能力。國內近年來肝移植也得到快速發展,年移植數在千例左右,開展的單位不斷增加,存活率得到提高,在先進的單位,開展的項目和水平逐漸接近國際水平。
目的 探討缺血預處理(ischemic preconditioning,IP)對大鼠移植肝臟缺血再灌注損傷的保護作用。方法采用SD大鼠原位肝移植動物模型,供肝冷保存時間100 min,無肝期25 min。64只SD大鼠隨機均分成兩組: 對照組,獲取供肝前僅以肝素生理鹽水經門靜脈灌注; IP組,獲取供肝前阻斷肝門血供10 min,再灌注10 min,然后再以肝素生理鹽水經門靜脈灌注。每組受體的一半(n=8)用于觀察存活率,另一半(n=8)用于移植肝臟再灌注2 h后取血及肝臟檢測。結果IP組的1 w存活率、膽汁分泌量、抗氧化酶活力、血清NO水平均明顯高于對照組(P<0.05),血清ALT、AST、LDH、TNF及肝組織中的過氧化產物含量均明顯低于對照組(P<0.05),組織的病理改變也輕于對照組。結論IP能夠提高血清NO水平,降低血清TNF含量,對大鼠移植肝臟的缺血再灌注損傷具有保護作用。
用有機鍺(Ge-132)試驗治療荷移植肝癌小鼠。結果:Ge-132高劑量(12.5mg/次)治療組的抑癌率為31.0%,移植肝癌白細胞(WBC)浸潤(+++)占72.7%、血清超氧化物歧化酶(SOD)活性為121 Nu/ml,而生理鹽水對照治療組相應的后兩項指標分別為36.4%及81 Nu/ml,兩組比較有顯著性差異(P<0.05);環磷酰胺(CTX)治療組的抑癌率為37.0%,癌體WBC浸潤(+++)為27.3%,血清SOD活性為102 Nu/ml;Ge-132高劑量與CTX聯合治療組的抑癌率為450%,癌體WBC浸潤(+++)為545%,血清SOD活性為142Nu/ml,兩組比較,后二項指標有顯著性差異(P<0.05)。由此提示Ge-132高劑量能明顯增強荷移植肝癌小鼠的細胞免疫及血清SOD活性,并有一定的抗移植肝癌作用。
目的 建立穩定的大鼠40%小體積肝移植動脈化模型,并觀察術后移植肝的病理變化。方法 采用改良二袖套法建立大鼠40%小體積肝移植動脈化(供鼠腹腔動脈與受鼠右腎動脈套入式吻合)模型,觀察7 d生存率,并于術后1、2、4及7 d檢測肝功能及觀察移植肝組織學變化。結果 手術成功率為93.3%,7 d生存率為60.0%,無肝期平均(12.0±2.5) min,丙氨酸轉氨酶(ALT)、總膽紅素(TB)于術后第1天即明顯增高,第2天達高峰,以后逐漸降低。組織學檢查顯示,術后第1天可見中央靜脈及肝竇擴張,匯管區有較多單核細胞浸潤; 術后第4天可見較多二倍體和多倍體肝細胞。結論 通過技術改進,簡化了手術操作,提高了手術成功率及模型的穩定性。缺血及門靜脈高壓力再灌注損傷是移植肝病理改變的根本原因。
目的 總結再次肝移植的臨床經驗。方法 對6例患者施行再次肝移植,再次肝移植的原因分別為原發性移植肝無功能(2例)、排斥反應(2例)、膽管吻合口狹窄(1例)以及原發性硬化性膽管炎(1例)。供肝植入采用背馱式及經典原位肝移植術; 術后免疫抑制治療采用他克莫司(tacrolimus)、嗎替麥考酚酯(MMF)和激素三聯免疫抑制方案。結果 5例治愈,已分別存活16個月、11個月、8個月、5個月及2個月,1例于術后第4 天死于多器官功能衰竭。術后并發癥有深部真菌感染及切口感染。結論 再次肝移植是移植肝功能衰竭的有效治療方法,適應證及手術時機的正確把握、圍手術期的嚴密監測和正確處理是提高再次肝移植患者存活率的關鍵。
目的 探討肝動脈重建在大鼠小體積肝移植中的意義。方法 采用改良二袖套法建立大鼠40%小體積肝移植模型,實驗分重建動脈組和未重建動脈組,觀察1周生存率,并于術后1、2、4及7 d檢測肝功能、觀察移植肝組織學變化以及免疫組化法檢測肝細胞增殖細胞核抗原(PCNA)的表達。結果 重建動脈組1周生存率為65.0%(13/20),未重建動脈組1周生存率為50.0%(10/20),2組比較差異無統計學意義(Pgt;0.05)。2組ALT和TB于術后第1天即開始明顯升高,第2天達高峰,以后逐漸降低; 重建動脈組TB于第2、7天低于未重建動脈組,ALT于第2、4天低于未重建動脈組,差異均有統計學意義(P<0.05)。重建動脈組術后中央靜脈及肝竇擴張程度較未重建動脈組相對較輕,可見較多二倍體和多倍體肝細胞; 2組大鼠移植肝的肝細胞中PCNA表達均于術后第2天達高峰,重建動脈組術后第1天的PCNA表達陽性率高于未重建動脈組(P<0.01),而術后第7天則低于未重建動脈組,差異有統計學意義(P<0.05)。結論 肝動脈重建可明顯改善大鼠小體積移植肝的功能,促進移植肝的再生,有效地保護移植肝的組織學結構,重建動脈組術后早期肝細胞增殖較未重建動脈組活躍。
目的 探討鋅指蛋白A20對同種異體大鼠30%小體積移植肝再生與排斥及受體存活時間的影響。方法 采用急性排斥組合DA (RT1a)大鼠→Lewis (RT1l)大鼠建立同種異體大鼠30%小體積肝移植模型。 75只大鼠均分為A20腺病毒組(A20組)、對照空腺病毒組(rAdEasy組)及對照生理鹽水組(PS組)3組。 供肝切取后采用離體門靜脈灌注法轉基因干預,肝臟灌洗后移植。 觀察受體存活時間及排斥反應,檢測移植肝A20表達、肝細胞再生與凋亡、肝血竇內皮細胞(LSECs)中NF-κB活性與ICAM-1 mRNA表達、移植肝浸潤單核細胞(LIMCs)總數及自然殺傷(NK)細胞和自然殺傷T(NKT)細胞數以及血清IFN-γ 水平。 結果 A20組受體大鼠存活時間長于PS組大鼠和rAdEasy組大鼠(P=0.001 8),而PS組大鼠存活時間又長于rAdEasy組大鼠(P=0.001 8)。 A20促進小體積移植肝再生,肝移植后4 d A20組大鼠肝細胞BrdU標記指數高于PS組大鼠和rAdEasy組大鼠(P<0.01); A20組大鼠肝細胞凋亡指數低于PS組大鼠和rAdEasy組大鼠(P<0.01)。 肝移植術后4 d,組織學檢測結果顯示A20組大鼠移植肝有少量細胞浸潤,呈輕度排斥; 而PS 組和rAdEasy組大鼠移植肝有大量細胞浸潤,呈重度排斥。 A20能抑制移植后早期(1 d) LSECs 中NF-κB活性和 ICAM-1 mRNA 表達。 流式細胞術檢測結果顯示A20能下調移植肝LIMCs數,包括下調NK和NKT 亞群細胞數,并下調血清IFN-γ 水平(P<0.05)。 結論 A20能有效促進同種異體大鼠30%小體積移植肝再生,抑制排斥并延長受體存活時間,其功效可能與抑制LSECs中NF-κB活性、抑制LIMCs浸潤及減少NK 細胞和NKT 細胞浸潤入肝以及抑制肝細胞凋亡有關。