目的 觀察動態力學加載對低溫 3D 打印聯合冷凍干燥法制備的三維仿生復合支架材料內 MC3T3-E1 細胞增殖、分化、成骨特異性基因表達的影響。方法 將絲素蛋白、Ⅰ型膠原、羥基磷灰石按質量比 3∶9∶2 混合后，采用低溫 3D 打印聯合冷凍干燥技術制備三維仿生復合支架；大體觀察支架外形，Micro-CT 觀察支架孔徑及孔隙率，測定吸水膨脹率以及應力、應變、彈性模量。取 MC3T3-E1 細胞接種至三維仿生復合支架，隨機分成兩組：實驗組培養期間行動態力學加載，每天 1 次、每次 15 min、頻率 1 Hz、應變 3 500 με；對照組不作力學加載。培養 7、14 d，分別對細胞-支架復合物行 HE 染色及掃描電鏡觀察細胞在支架上生長情況；Western blot 以及實時熒光定量 PCR 檢測 Ⅰ型膠原、BMP-2、骨鈣素（osteocalcin，OCN）蛋白及 mRNA 表達。結果 制備的三維仿生復合支架為白色立方體網格，Micro-CT 檢測見支架材料內部呈孔隙網狀結構，孔隙連通性良好；大孔徑直徑為（506.37±18.63）μm，微孔徑直徑為（62.14±17.35）μm，孔隙率為 97.70%±1.37%，吸水膨脹率為 1 341.97%±64.41%。力學測試示，支架壓縮至 10% 時，支架壓縮位移為（0.376±0.004）mm、壓縮應力為（0.016±0.002）MPa、彈性模量為（162.418±18.754）kPa。復合培養 7、14 d，兩組 HE 染色及掃描電鏡均見細胞在支架內部生長，主要分布在支架孔壁周圍，其中實驗組細胞較對照組增多，且細胞由梭形變為扁平狀。除 200 倍鏡下 14 d 時兩組細胞計數差異無統計學意義（t=–2.024，P=0.080）外，其余不同放大倍數（40、100、400 倍）下各時間點實驗組細胞數均顯著高于對照組（P<0.05）。實時熒光定量 PCR 檢測示：實驗組培養 7、14 d 時Ⅰ型膠原、OCN mRNA 相對表達量顯著高于對照組（P<0.05），但 BMP-2 mRNA 相對表達量與對照組比較差異無統計學意義（P>0.05）。Western blot 檢測示，實驗組培養 7、14 d 時Ⅰ型膠原、BMP-2、OCN 蛋白相對表達量均顯著高于對照組（P<0.05）。結論 動態力學加載后，接種于三維仿生復合支架的 MC3T3-E1 細胞 BMP-2、Ⅰ型膠原、OCN 表達明顯上調，表明適當力學載荷有利于 MC3T3-E1 細胞向成骨細胞分化。