目的 總結吻合血管游離腓骨移植(free vascularized fibular grafting,FVFG)治療股骨頭缺血性壞死(osteonecrosis of femoral head,ONFH)的臨床技術,以及改進的手術器械在術中應用價值。 方法 2011 年 3 月—2013 年 1 月,采用改進的手術器械行FVFG治療ONFH患者 35 例(47髖)。男 24 例(32 髖),女 11 例(15 髖);年齡 22~43 歲,平均 34 歲。單髖 23 例,雙髖 12 例。病程 5~9 個月,平均 7 個月。ONFH類型:酒精性 25 髖,激素性 12 髖,創傷性 3 髖,特發性 7 髖。術前行 X 線片檢查,根據國際骨循環協會(ARCO)分期標準:Ⅰ期 3 髖,Ⅱ 期 39 髖,Ⅲ 期 5 髖。術前髖關節 Harris 評分為(58.2±6.1)分。 結果 術中切取腓骨時間為 15~35 min,平均 25 min;手術時間 90~200 min,平均 130 min。術中出血量為 150~500 mL,平均 270 mL。術后切口均Ⅰ期愈合,無感染、下肢深靜脈血栓形成等并發癥發生。患者均獲隨訪,隨訪時間 12~42 個月,平均 28 個月。末次隨訪時 Harris 評分為(87.3±5.7)分,較術前顯著提高,比較差異有統計學意義(t=102.038,P=0.000)。X 線片復查示,腓骨瓣位置良好,末次隨訪時股骨頭壞死改善 9 髖,無進展 36 髖,進展 2 髖。 結論 采用 FVFG 治療 ONFH 能有效改善患者髖關節功能,術中應用改進的手術器械能提高手術效率。
目的研究雪旺細胞(Schwann cells,SCs)對BMSCs來源內皮細胞分泌一氧化氮(nitric oxide,NO)功能的影響,為進一步探究組織工程骨成骨過程中神經因素對血管因素的作用奠定實驗基礎。 方法取1日齡SD乳鼠坐骨神經及臂叢神經,體外分離獲取SCs,采用S-100免疫組織化學染色鑒定;取2周齡SD大鼠脛骨及股骨骨髓,體外分離獲取BMSCs,誘導分化成為內皮細胞,采用血管性血友病因子與CD31免疫熒光染色鑒定。采用Transwell共培養板對SCs與BMSCs來源內皮細胞進行非接觸共培養作為實驗組,單純培養BMSCs來源內皮細胞作為對照組,分別于1、3、5、7 d檢測培養液中NO濃度,1、3、7、10 d采用實時熒光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)檢測一氧化氮合酶2(nitric oxide synthetase 2,NOS2)、NOS3 mRNA表達。 結果分離及誘導分化的細胞通過形態學及免疫組織化學和免疫熒光染色鑒定為SCs和內皮細胞。實驗組及對照組內各時間點間釋放NO濃度比較,差異均有統計學意義(P<0.05);除3 d外,其余各時間點實驗組釋放NO濃度均顯著高于對照組(P<0.05)。RT-qPCR檢測結果示,培養各時間點實驗組NOS2 mRNA相對表達量均顯著高于對照組(P<0.05);兩組內各時間點間比較差異均有統計學意義(P<0.05)。除10 d外,其余各時間點實驗組NOS3 mRNA相對表達量均顯著高于對照組(P<0.05);實驗組內各時間點間NOS3 mRNA相對表達量比較差異均無統計學意義(F=6.673,P=0.062),對照組內各時間點間比較差異均有統計學意義(F=36.581,P=0.000)。 結論SCs可促進BMSCs來源內皮細胞釋放NO,可能與SCs促進NOS活性有關。