目的探討人體外泌汗腺組織體外三維培養方法，并對構建的三維組織進行形態學分析。 方法取整形手術患者自愿捐贈的正常腹部全層皮膚，經Ⅱ型膠原酶消化分離人體外泌汗腺組織，以含5 ng/mL重組人EGF、25 mg/mL牛垂體提取物、100 U/mL青霉素和100 μg/mL鏈霉素的無血清角質細胞培養基進行培養。倒置相差顯微鏡下觀察細胞生長情況。待原代細胞達80%融合后，調整細胞濃度至1×105個/mL；取0.3 mL細胞懸液與0.3 mL Matrigel基底膜基質混勻培養，倒置相差顯微鏡下觀察細胞生長情況。培養14 d后，取標本行冰凍切片，HE染色觀察細胞形態結構，免疫組織化學染色檢測細胞角蛋白7（cytokeratin 7，CK7）和CK19抗原表達。 結果倒置相差顯微鏡觀察示，經Ⅱ型膠原酶消化后大量汗腺組織游離；貼壁后3～5 d長出汗腺細胞，細胞持續分裂達2～3周，形成圍繞汗腺組織塊的環狀單層；3～4周后細胞衰老。汗腺細胞接種于Matrigel基底膜基質中2～3 d，細胞開始分裂，隨后形成小細胞團、管狀結構以及類球狀結構；約2周時混合培養物開始液化，培養終止。HE染色示部分細胞形成中空管狀結構，管壁由1～2層細胞構成，類似于在體汗腺的分泌部和導管部；免疫組織化學染色見培養的汗腺細胞CK7和CK19表達均呈陽性。 結論人汗腺細胞接種于Matrigel基底膜基質三維培養，形成的組織結構模擬了在體汗腺的組織形態結構。