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        華西醫學期刊出版社
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        找到 關鍵詞 包含"miR-135a" 1條結果
        • 人羊膜間充質干細胞外泌體通過微小 RNA-135a促進成纖維細胞遷移實驗研究

          目的研究人羊膜間充質干細胞外泌體(human amniotic mesenchymal stem cell exosome,hAMSC-Exo)中的微小 RNA-135a(microRNA-135a,miR-135a)對成纖維細胞遷移的作用。方法用外泌體分離試劑盒提取 hAMSC-Exo 并進行鑒定,劃痕實驗檢測 hAMSC-Exo 對成纖維細胞遷移的作用。實時熒光定量 PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,qRT-PCR)檢測過表達 miR-135a 后 hAMSC-Exo 中 miR-135a 基因相對表達量,劃痕實驗檢測過表達和敲減 miR-135a 后 hAMSC-Exo 對成纖維細胞遷移的作用,Western blot 檢測過表達和敲減 miR-135a 后 hAMSC-Exo 成纖維細胞遷移相關蛋白[大分子腫瘤抑制因子 2(large tumor suppressor 2,LATS2)、E-鈣黏著蛋白(E-cadherin)、N-cadherin、α 平滑肌肌動蛋白(α smooth muscle actin,α-SMA)]的相對表達量;均以 293T 細胞外泌體及 hAMSC-Exo 作為對照。結果成功獲得 hAMSC-Exo;劃痕實驗檢測示,hAMSC 組促進成纖維細胞遷移能力最強,GW4869(外泌體抑制劑)處理 hAMSC 組促進成纖維細胞遷移能力減弱。qRT-PCR 檢測示過表達 miR-135a 后,hAMSC-Exo 中 miR-135a 基因相對表達量明顯增加。劃痕實驗檢測示,過表達 miR-135a 后,hAMSC-Exo 促進成纖維細胞遷移能力增強;而敲減 miR-135a 后,hAMSC-Exo 促進成纖維細胞遷移能力減弱。Western blot 檢測成纖維細胞遷移相關蛋白顯示,與 293T 細胞外泌體組比較,各 hAMSC-Exo 處理組均下調 E-cadherin、N-cadherin 和 LATS2 表達,上調 α-SMA 表達;其中過表達 miR-135a 后,hAMSC-Exo 能力增強,敲減 miR-135a 后,hAMSC-Exo 能力較過表達 miR-135a 組下降。結論hAMSC-Exo 中的 miR-135a 可促進成纖維細胞遷移,抑制 E-cadherin、N-cadherin 和 LATS2 表達,促進 α-SMA 表達。

          發表時間:2020-02-20 05:18 導出 下載 收藏 掃碼
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