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        華西醫學期刊出版社
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        找到 關鍵詞 包含"miRNA-203" 1條結果
        • miRNA-203轉染誘導人表皮干細胞向汗腺細胞分化的研究

          目的探討miRNA-203轉染誘導人表皮干細胞向汗腺細胞分化的可能性及機制。 方法取包皮環切術獲得的人正常包皮組織5例,采用0.25%胰蛋白酶-EDTA聯合消化法分離表皮和真皮,應用Ⅳ型膠原差速貼壁法純化人表皮干細胞,倒置相差顯微鏡下觀察細胞生長狀況,行β1整合素(integrin β1,ITGB1)、角蛋白19(cytokeratin 19,CK19)、CK1、CK10、CK18、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)免疫細胞化學染色鑒定。通過脂質體轉染將miRNA-203模擬物導入人表皮干細胞(實驗組),轉染對照miRNA模擬物作為對照組。免疫細胞化學染色法對轉染后細胞行ITGB1、CK19、CK1、CK10、CK18、CEA單克隆抗體檢測鑒定;實時熒光定量RT-PCR檢測轉染前及轉染后72 h的細胞中miRNA-203、P63、ITGB1、CK19、CK1、CK10、CK18、CEA mRNA相對表達量;Western blot法檢測P63、ITGB1、CK19、CK1、CK10、CK18、CEA蛋白相對表達量;并對miRNA-203的mRNA表達與P63的mRNA和蛋白表達分別行Pearson相關分析。 結果轉染前人表皮干細胞CK19、ITGB1陽性表達,轉染后CK1、CK10、CK18、CEA陽性表達。實驗組轉染后細胞miRNA-203 mRNA相對表達量顯著高于轉染前(P<0.05)。實驗組轉染后細胞CK1、CK10、CK18、CEA mRNA及蛋白的相對表達量均高于轉染前及對照組,而P63、CK19、ITGB1 mRNA及蛋白的相對表達量均低于轉染前和對照組,比較差異均有統計學意義(P<0.05)。上述指標對照組與轉染前比較差異均無統計學意義(P>0.05)。轉染前后miRNA-203的mRNA表達量與P63的mRNA和蛋白相對表達量均成負相關,轉染前相關系數分別為—0.91(t=3.862,P=0.042)及—0.96(t=5.971,P=0.009);轉染后相關系數分別為—0.92(t=4.283,P=0.031)及—0.95(t=5.842,P=0.011)。 結論miRNA-203能誘導人表皮干細胞分化為汗腺細胞,其作用可能是通過靶向抑制P63來實現的。

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