引用本文： 楊先偉, 陶浪, 魏金文, 劉謹賢. 包蟲病特異性疫苗抗原研究現狀及展望. 中國普外基礎與臨床雜志, 2023, 30(6): 734-738. doi: 10.7507/1007-9424.202212066 復制
包蟲病又稱棘球蚴病（echinococcosis），常分為囊型包蟲病（cystic echinococcosis，CE）和泡型包蟲病（alveolar echinococcosis，AE）兩類，是流行于世界畜牧業和農業地區常見的人畜共患的嚴重寄生蟲疾病[1]。人類因不慎食入被棘球蚴蟲卵污染的食物或水等被感染，蟲卵進入上消化道后，在小腸內孵化成六鉤蚴，循門靜脈系統進入肝臟和全身。肝臟是受累最為嚴重的器官[2-3]，此外還可能侵犯肺、腦、腎、心臟、骨骼肌等。若無法得到有效治療，泡型包蟲病10年死亡率超過90%[4]，囊型包蟲病死率為2%～4%。近年來，伴隨著人口流動、旅游業發展和犬只的急劇增多，WHO已將包蟲病列為17種被嚴重忽視的、應于2050年消除或控制的疾病之一，是嚴重的全球性公共衛生問題之一[1]。我國西部9個省份的棘球蚴病流行仍然十分嚴重，報告病例數呈增多趨勢，牧民和農民、青中年為高發人群[5]。四川省是受包蟲病危害最為嚴重的地區之一，其中石渠縣患病率曾高達12.09%，2020年甘孜州患病率仍高達1.11%[6]。
研究實用性較強的基因工程疫苗是目前疫苗研究的焦點[7-8]，而要發展成為市場需要的商品化疫苗，要求是能夠阻止六鉤蚴在羊和人等中間宿主進化成棘球蚴，同時也要阻止犬腸道內蟲體成熟，因而需要進行大量的基礎研究和臨床樣本驗證。目前還沒一種人用抗包蟲病商品化的疫苗上市。原頭節抗原、生發層抗原、囊液和成熟棘球蚴蛋白是天然抗原疫苗研究方向[9]，但是程序繁瑣，對實驗室及操作要求嚴格，而保護力在66.7%～94.7%。近年來，國內外學者在包蟲病感染相關的重組疫苗方面做了大量基礎研究，有希望為未來疫苗的開發和應用帶來希望。筆者現就包蟲病特異性疫苗抗原研究及進展綜述如下。
1 血清特異性IgG
人感染包蟲病后，隨著體內病灶進展，血清特異性抗體出現變化，IgG發揮著抵抗棘球蚴感染或延遲疾病進展的作用。既往研究[10]發現，若在獲得性免疫缺陷病的CE患者中，可觀察到CE病灶進展迅速。溫浩團隊[11]報道，在外囊切除或部分切除的CE患者術后血清IgG水平高于內囊完整切除手術組，提示IgG與持續感染密切相關。近年，Zhou等[12]發現重組多房棘球蚴亮氨酸氨基肽酶（recombinant E. multilocularis leucine aminopeptidase，rEm-LAP）可誘導特異性免疫應答，產生高水平的IgG、IgG1和IgG2a，抑制多房棘球蚴感染BALB/c小鼠的囊腫生長和侵襲。Chen等[13]通過重組特異性鈣調蛋白在小鼠實驗中也發現上述類似現象。盡管如此，尚無將純化的特異性IgG和IgG4用于臨床預防棘球蚴感染及阻斷病情進展的相關報道。
2 包蟲病特異性疫苗抗原
2.1 細粒棘球蚴95（echinococcus granulosus 95，Eg95）及多房棘球絳蟲95（echinococcus multilocularis 95，Em95）蛋白
Eg95是最先發現具有保護效力的“明星蛋白”，該疫苗蛋白的保護性在綿羊、山羊、牛等[14]中得到證實，已在中國和南美[15]、澳洲[1]等地區應用。經過重組Eg95免疫之后，羊在感染六鉤蚴時產生的特異IgG可維持12個月以上，免疫后的母羊還可以傳給子代羊羔。Eg95抗原重組肽Eg95-1、Eg95-2和Eg95-3仍可誘導綿羊產生高水平IgG。近年Xu等[16]將Eg95重組表達在狂犬病毒顆粒中，提示Eg95有可能被開發為一種有效的二價疫苗，用于預防或治療流行地區 CE 和狂犬病。另外，近年Gauci等[17]將純化Eg95蛋白的工藝改良后，免疫綿羊后能達到98%的保護力。
作為Eg95的同源性蛋白， Em95抗原在多房棘球蚴感染宿主過程中的保護作用、棘球蚴體外診斷等[18]方面也受到了越來越多的關注。Em95抗原最先由Gauci等[19]于2002年用多房棘球蚴基因組DNA重組并進行了相應的功能研究，他們用重組的Em95抗原連續免疫6周齡的雌性BALB/c小鼠后，給小鼠經口喂養3 000個多房棘球蚴蟲卵，發現Em95抗原對小鼠的保護率達到了78.5%～82.9%。為對Em95抗原的免疫保護作用機制做進一步確認，Wang等[20]應用大腸桿菌表達系統對Em95抗原進行了重組，分別表達出了Em95-1和Em95-2兩個子抗原，他們進一步采取兔、AE患者血清和健康自愿者血清進行試驗，發現兩個子抗原與患者和感染兔的血清發生免疫結合，而未與正常對照組血清發生結合。這些研究證實了Em95抗原具有很好的免疫原性和抗原性，同時也為Em95能夠應用于疫苗的研發提供了重要的理論依據。
2.2 細粒棘球蚴抗原（echinococcus granulosus antigen 31，EgA31）及EgA31多價聯合抗原
EgA31是Fu等[21]在CE感染犬只后，從犬血清中提取的一種與棘球蚴吸盤肌纖維運動收縮相關的蛋白，進一步分析與肌球蛋白同源，能在自然感染的動物或實驗模型中誘導較強的免疫反應。 將50 μg 的EgA31-谷胱甘肽S-轉移酶（glutathione S-transferase，GST）融合抗原免疫幼犬后，發現其淺表淋巴結增生，T淋巴細胞處于較強增殖狀態；將 Eg95和EgA31聯合重組的新型抗原（rEg95- EgA31）免疫BALB/c小鼠后，接種原頭蚴后小鼠體內減蟲率可達64.1%，并顯著升高CD4+ T細胞比例和刺激脾臟細胞增殖[22]。近年，新疆Li等[23]利用EgA31和EgG1Y162豐富的B/T細胞抗原表位等優勢將兩者重組形成聯合多價抗原，具有良好的免疫原性。
2.3 EmY162及EgG1Y162 抗原
EmY162抗原由Katoh等[24]于2008年最先報道，他們通過cDNA文庫中EmY162 cDNA信息，重組并純化出一分子質量為17.0×103、由153個氨基酸構成的多房棘球蚴蛋白。EmY162抗原在多房棘球蚴4個生命周期中都有分泌，EmY162抗原含有1個信號肽序列，1個纖維連接蛋白Ⅲ型基序和1個假定的跨膜結構域，這些結構也存在于Em95抗原中。由于Em95抗原被視為多房棘球蚴感染過程中的保護性抗原，EmY162的相關研究也大多集中在疫苗的研制上。格日力等[25]通過大腸桿菌表達系統構建了不耐熱腸毒素B亞單位疫苗—LTB-EmY162，在用50 μg 的LTB-EmY162抗原免疫小鼠后，給予腹腔注射原頭節1 000個/只，發現與陰性對照組相比，LTB-EmY162抗原免疫后小鼠腹腔內病灶的大小、數量和重量都明顯減少或減輕，表明該抗原起到了很好的免疫保護作用。 LTB-EmY162抗原誘導小鼠產生抗EmY162和多房棘球蚴原頭節蛋白的高濃度IgG抗體，促進T淋巴細胞增殖并分泌白細胞介素-4（interleukin-4，IL-4）和干擾素-γ（interferon-γ，IFN-γ），誘導Th1/Th2混合型的免疫應答。曹春寶等[26]從細粒棘球蚴中篩選出EgG1Y62抗原，分析顯示與EmY162在基因序列、蛋白結構等高度同源。隨后，Ma等[27]在重組BCG -EgG1Y162和EgG1Y161/2上均觀察到較強的Th1細胞免疫及高水平IgG。
2.4 Em14-3-3 及 Eg14-3-3
Em14-3-3/Eg14-3-3蛋白是一分子質量在30×103 內的酸性蛋白家族，具有高度的保守性。14-3-3蛋白有多個亞型，Southern印跡雜交也提示在棘球絳蟲內有多個14-3-3編碼基因。目前多房棘球蚴14-3-3蛋白已鑒定的亞型有3個[28]，分別為14-3-3.1、 14-3-3.2和14-3-3.3。 從發生學上來看，14-3-3.1和14-3-3.2趨向于哺乳動物14-3-3蛋白ζ亞型（14ζ），而14-3-3.3則趨向于ε亞型。Pourseif等[29]對狗和羊進行兩輪免疫純化后的14-3-3疫苗后發現血清IgG升高，總的棘球蚴總數減少約85.43%。14-3-3蛋白家族可能是生發層主要成分，在多房棘球蚴感染宿主過程中的作用和機制及相關疫苗的研發[30]等方面具有潛在的研究價值。同時，最近的腫瘤相關抑制14-3-3蛋白活性的藥物，亦是棘球蚴治療的一個潛在方向。
2.5 EgM家族
郭寶平等[31]利用DDRT-PCR法從Eg不同生活史分離出EgM家族基因，EgM9就是這家族之一，重組EgM9免疫比格犬后的血清中檢測的IgG、IgG1和IgG2水平在實驗組顯著升高，另外，EgM4、EgM9和EgM123在犬口服48 000個原頭節后，保護力仍可高達97%～100%。張文寶團隊[32]后續研究發現，給犬EgM9和EgM123免疫3次后，再給與口服20萬個原頭蚴，隨后第45天檢測糞便含蟲卵量，發現觀察組的排蟲卵量較對照組明顯減少，延長觀察至第170天，糞便蟲卵含量仍較低，抑制蟲卵效應持續存在，表明EgM9和EgM123可作為犬候選抗包蟲疫苗[23, 31-32]。
3 其他特異性抗原及DNA疫苗
3.1 其他重組蛋白疫苗
包括Eg5、Eg48、Eg53、Emp53、Eg101、Eg嗜肌蛋白、Eg鐵蛋白、Eg95-5G1、HSP70、 Em492、rEgP29[33]、四蛋白11（Eg-TSP11）等[34]。 近年也有中國學者[35]從棘球蚴中篩選出新型蛋白P-29，已證實其能夠誘導小鼠獲得較強的IFN-γ+CD4+ T細胞反應，抑制棘球蚴生長。除了上述研究比較多的抗原外，還有一些新發現的抗原也被證實在宿主-寄生蟲相互作用間有一定的作用，其中包括了TSP-3抗原、 EmTIP抗原、EmP29抗原、EmABP抗原、EgTEG、Epc1等。
3.2 DNA疫苗
目前DNA疫苗有10余篇文獻報道，主要是Eg95、脂肪酸結合蛋白（fatty acid-binding proteins，FABPs） [36]、抗原B等，其保護力在64.1%～96.6%，其中在IgG水平和Th1/Th2細胞因子變化較明顯。
4 棘球蚴疫苗研究工具及佐劑
根據2021年1篇系統分析[37]，BALB/c小鼠和綿羊是常規用于疫苗研究的實驗動物，其次是ICR小鼠、C57BL/6小鼠、犬、兔、牛等。蛋白抗原/疫苗常溶解在完全弗氏佐劑（complete Freund’s adjuvant，CFA）、不完全弗氏佐劑（incomplete Freund’s adjuvant，IFA）、皂苷A（Quil A）等。給藥途徑主要是腹背部皮下注射，其次有鼻腔吸入、腹腔注射、口服、肌肉注射等。最常用的抗原劑量為50 μg，其次100 μg，通常免疫4次，每次間隔1周。感染原頭節數量以2 000個最為常見，較低原頭節數量不易誘發和觀察免疫效果。
5 總結及展望
包蟲病作為一種嚴重致死性寄生蟲疾病，目前治療手段并不豐富[38-39]，對于“包蟲-宿主”炎性反應微環境的認識仍不清楚[40]，手術切除聯合術后藥物治療仍是治療包蟲病的首選方案。但是由于起病隱匿，且患者位于偏遠地區，往往疾病發現時已處于晚期，只能進行對癥支持和藥物治療，但是效果都不理想。攻克包蟲病，需“防治結合”。
預防方面，重在環境和衛生教育以及疫苗研發。2019年Lass 等[41]對波蘭105份河流水樣（各50 L）行采用rtPCR方法檢測多房棘球蚴的12S rRNA后發現，多房棘球蚴基因檢出陽性率高達1.9%，表明水源環境蟲卵污染仍是需要關注的問題。在疫苗方面，與血吸蟲、瘧疾等其他寄生蟲相比，包蟲疫苗研究相對落后，這可能與其復雜的生活史和結構改變有關，盡管在Eg95疫苗和犬用疫苗方面有較大進展，但人用疫苗的空白仍是當今包蟲病防護需要關注的核心問題之一。
最后，在科技日新月異的21世紀，伴隨著5G技術、遠程醫療（遠程影像診斷、實時疫區動態診斷數據、疫情匯報制度）、人工智能、納米藥物等的發展，新世紀信息科技革命和醫療診療技術變革的交匯，必將孕育包蟲病防控新內涵。我們相信，中國最終會清滅包蟲病，徹底改變“因包蟲病致貧、因包蟲病返貧”的狀況，也一定能夠為全球樹立包蟲病防控的典范。
重要聲明
利益沖突：所有作者聲明無利益沖突。
作者貢獻：楊先偉負責文獻收集、論文撰寫及修改；陶浪、魏金文和劉謹賢參與文獻檢索及論文修改。
包蟲病又稱棘球蚴病（echinococcosis），常分為囊型包蟲病（cystic echinococcosis，CE）和泡型包蟲病（alveolar echinococcosis，AE）兩類，是流行于世界畜牧業和農業地區常見的人畜共患的嚴重寄生蟲疾病[1]。人類因不慎食入被棘球蚴蟲卵污染的食物或水等被感染，蟲卵進入上消化道后，在小腸內孵化成六鉤蚴，循門靜脈系統進入肝臟和全身。肝臟是受累最為嚴重的器官[2-3]，此外還可能侵犯肺、腦、腎、心臟、骨骼肌等。若無法得到有效治療，泡型包蟲病10年死亡率超過90%[4]，囊型包蟲病死率為2%～4%。近年來，伴隨著人口流動、旅游業發展和犬只的急劇增多，WHO已將包蟲病列為17種被嚴重忽視的、應于2050年消除或控制的疾病之一，是嚴重的全球性公共衛生問題之一[1]。我國西部9個省份的棘球蚴病流行仍然十分嚴重，報告病例數呈增多趨勢，牧民和農民、青中年為高發人群[5]。四川省是受包蟲病危害最為嚴重的地區之一，其中石渠縣患病率曾高達12.09%，2020年甘孜州患病率仍高達1.11%[6]。
研究實用性較強的基因工程疫苗是目前疫苗研究的焦點[7-8]，而要發展成為市場需要的商品化疫苗，要求是能夠阻止六鉤蚴在羊和人等中間宿主進化成棘球蚴，同時也要阻止犬腸道內蟲體成熟，因而需要進行大量的基礎研究和臨床樣本驗證。目前還沒一種人用抗包蟲病商品化的疫苗上市。原頭節抗原、生發層抗原、囊液和成熟棘球蚴蛋白是天然抗原疫苗研究方向[9]，但是程序繁瑣，對實驗室及操作要求嚴格，而保護力在66.7%～94.7%。近年來，國內外學者在包蟲病感染相關的重組疫苗方面做了大量基礎研究，有希望為未來疫苗的開發和應用帶來希望。筆者現就包蟲病特異性疫苗抗原研究及進展綜述如下。
1 血清特異性IgG
人感染包蟲病后，隨著體內病灶進展，血清特異性抗體出現變化，IgG發揮著抵抗棘球蚴感染或延遲疾病進展的作用。既往研究[10]發現，若在獲得性免疫缺陷病的CE患者中，可觀察到CE病灶進展迅速。溫浩團隊[11]報道，在外囊切除或部分切除的CE患者術后血清IgG水平高于內囊完整切除手術組，提示IgG與持續感染密切相關。近年，Zhou等[12]發現重組多房棘球蚴亮氨酸氨基肽酶（recombinant E. multilocularis leucine aminopeptidase，rEm-LAP）可誘導特異性免疫應答，產生高水平的IgG、IgG1和IgG2a，抑制多房棘球蚴感染BALB/c小鼠的囊腫生長和侵襲。Chen等[13]通過重組特異性鈣調蛋白在小鼠實驗中也發現上述類似現象。盡管如此，尚無將純化的特異性IgG和IgG4用于臨床預防棘球蚴感染及阻斷病情進展的相關報道。
2 包蟲病特異性疫苗抗原
2.1 細粒棘球蚴95（echinococcus granulosus 95，Eg95）及多房棘球絳蟲95（echinococcus multilocularis 95，Em95）蛋白
Eg95是最先發現具有保護效力的“明星蛋白”，該疫苗蛋白的保護性在綿羊、山羊、牛等[14]中得到證實，已在中國和南美[15]、澳洲[1]等地區應用。經過重組Eg95免疫之后，羊在感染六鉤蚴時產生的特異IgG可維持12個月以上，免疫后的母羊還可以傳給子代羊羔。Eg95抗原重組肽Eg95-1、Eg95-2和Eg95-3仍可誘導綿羊產生高水平IgG。近年Xu等[16]將Eg95重組表達在狂犬病毒顆粒中，提示Eg95有可能被開發為一種有效的二價疫苗，用于預防或治療流行地區 CE 和狂犬病。另外，近年Gauci等[17]將純化Eg95蛋白的工藝改良后，免疫綿羊后能達到98%的保護力。
作為Eg95的同源性蛋白， Em95抗原在多房棘球蚴感染宿主過程中的保護作用、棘球蚴體外診斷等[18]方面也受到了越來越多的關注。Em95抗原最先由Gauci等[19]于2002年用多房棘球蚴基因組DNA重組并進行了相應的功能研究，他們用重組的Em95抗原連續免疫6周齡的雌性BALB/c小鼠后，給小鼠經口喂養3 000個多房棘球蚴蟲卵，發現Em95抗原對小鼠的保護率達到了78.5%～82.9%。為對Em95抗原的免疫保護作用機制做進一步確認，Wang等[20]應用大腸桿菌表達系統對Em95抗原進行了重組，分別表達出了Em95-1和Em95-2兩個子抗原，他們進一步采取兔、AE患者血清和健康自愿者血清進行試驗，發現兩個子抗原與患者和感染兔的血清發生免疫結合，而未與正常對照組血清發生結合。這些研究證實了Em95抗原具有很好的免疫原性和抗原性，同時也為Em95能夠應用于疫苗的研發提供了重要的理論依據。
2.2 細粒棘球蚴抗原（echinococcus granulosus antigen 31，EgA31）及EgA31多價聯合抗原
EgA31是Fu等[21]在CE感染犬只后，從犬血清中提取的一種與棘球蚴吸盤肌纖維運動收縮相關的蛋白，進一步分析與肌球蛋白同源，能在自然感染的動物或實驗模型中誘導較強的免疫反應。 將50 μg 的EgA31-谷胱甘肽S-轉移酶（glutathione S-transferase，GST）融合抗原免疫幼犬后，發現其淺表淋巴結增生，T淋巴細胞處于較強增殖狀態；將 Eg95和EgA31聯合重組的新型抗原（rEg95- EgA31）免疫BALB/c小鼠后，接種原頭蚴后小鼠體內減蟲率可達64.1%，并顯著升高CD4+ T細胞比例和刺激脾臟細胞增殖[22]。近年，新疆Li等[23]利用EgA31和EgG1Y162豐富的B/T細胞抗原表位等優勢將兩者重組形成聯合多價抗原，具有良好的免疫原性。
2.3 EmY162及EgG1Y162 抗原
EmY162抗原由Katoh等[24]于2008年最先報道，他們通過cDNA文庫中EmY162 cDNA信息，重組并純化出一分子質量為17.0×103、由153個氨基酸構成的多房棘球蚴蛋白。EmY162抗原在多房棘球蚴4個生命周期中都有分泌，EmY162抗原含有1個信號肽序列，1個纖維連接蛋白Ⅲ型基序和1個假定的跨膜結構域，這些結構也存在于Em95抗原中。由于Em95抗原被視為多房棘球蚴感染過程中的保護性抗原，EmY162的相關研究也大多集中在疫苗的研制上。格日力等[25]通過大腸桿菌表達系統構建了不耐熱腸毒素B亞單位疫苗—LTB-EmY162，在用50 μg 的LTB-EmY162抗原免疫小鼠后，給予腹腔注射原頭節1 000個/只，發現與陰性對照組相比，LTB-EmY162抗原免疫后小鼠腹腔內病灶的大小、數量和重量都明顯減少或減輕，表明該抗原起到了很好的免疫保護作用。 LTB-EmY162抗原誘導小鼠產生抗EmY162和多房棘球蚴原頭節蛋白的高濃度IgG抗體，促進T淋巴細胞增殖并分泌白細胞介素-4（interleukin-4，IL-4）和干擾素-γ（interferon-γ，IFN-γ），誘導Th1/Th2混合型的免疫應答。曹春寶等[26]從細粒棘球蚴中篩選出EgG1Y62抗原，分析顯示與EmY162在基因序列、蛋白結構等高度同源。隨后，Ma等[27]在重組BCG -EgG1Y162和EgG1Y161/2上均觀察到較強的Th1細胞免疫及高水平IgG。
2.4 Em14-3-3 及 Eg14-3-3
Em14-3-3/Eg14-3-3蛋白是一分子質量在30×103 內的酸性蛋白家族，具有高度的保守性。14-3-3蛋白有多個亞型，Southern印跡雜交也提示在棘球絳蟲內有多個14-3-3編碼基因。目前多房棘球蚴14-3-3蛋白已鑒定的亞型有3個[28]，分別為14-3-3.1、 14-3-3.2和14-3-3.3。 從發生學上來看，14-3-3.1和14-3-3.2趨向于哺乳動物14-3-3蛋白ζ亞型（14ζ），而14-3-3.3則趨向于ε亞型。Pourseif等[29]對狗和羊進行兩輪免疫純化后的14-3-3疫苗后發現血清IgG升高，總的棘球蚴總數減少約85.43%。14-3-3蛋白家族可能是生發層主要成分，在多房棘球蚴感染宿主過程中的作用和機制及相關疫苗的研發[30]等方面具有潛在的研究價值。同時，最近的腫瘤相關抑制14-3-3蛋白活性的藥物，亦是棘球蚴治療的一個潛在方向。
2.5 EgM家族
郭寶平等[31]利用DDRT-PCR法從Eg不同生活史分離出EgM家族基因，EgM9就是這家族之一，重組EgM9免疫比格犬后的血清中檢測的IgG、IgG1和IgG2水平在實驗組顯著升高，另外，EgM4、EgM9和EgM123在犬口服48 000個原頭節后，保護力仍可高達97%～100%。張文寶團隊[32]后續研究發現，給犬EgM9和EgM123免疫3次后，再給與口服20萬個原頭蚴，隨后第45天檢測糞便含蟲卵量，發現觀察組的排蟲卵量較對照組明顯減少，延長觀察至第170天，糞便蟲卵含量仍較低，抑制蟲卵效應持續存在，表明EgM9和EgM123可作為犬候選抗包蟲疫苗[23, 31-32]。
3 其他特異性抗原及DNA疫苗
3.1 其他重組蛋白疫苗
包括Eg5、Eg48、Eg53、Emp53、Eg101、Eg嗜肌蛋白、Eg鐵蛋白、Eg95-5G1、HSP70、 Em492、rEgP29[33]、四蛋白11（Eg-TSP11）等[34]。 近年也有中國學者[35]從棘球蚴中篩選出新型蛋白P-29，已證實其能夠誘導小鼠獲得較強的IFN-γ+CD4+ T細胞反應，抑制棘球蚴生長。除了上述研究比較多的抗原外，還有一些新發現的抗原也被證實在宿主-寄生蟲相互作用間有一定的作用，其中包括了TSP-3抗原、 EmTIP抗原、EmP29抗原、EmABP抗原、EgTEG、Epc1等。
3.2 DNA疫苗
目前DNA疫苗有10余篇文獻報道，主要是Eg95、脂肪酸結合蛋白（fatty acid-binding proteins，FABPs） [36]、抗原B等，其保護力在64.1%～96.6%，其中在IgG水平和Th1/Th2細胞因子變化較明顯。
4 棘球蚴疫苗研究工具及佐劑
根據2021年1篇系統分析[37]，BALB/c小鼠和綿羊是常規用于疫苗研究的實驗動物，其次是ICR小鼠、C57BL/6小鼠、犬、兔、牛等。蛋白抗原/疫苗常溶解在完全弗氏佐劑（complete Freund’s adjuvant，CFA）、不完全弗氏佐劑（incomplete Freund’s adjuvant，IFA）、皂苷A（Quil A）等。給藥途徑主要是腹背部皮下注射，其次有鼻腔吸入、腹腔注射、口服、肌肉注射等。最常用的抗原劑量為50 μg，其次100 μg，通常免疫4次，每次間隔1周。感染原頭節數量以2 000個最為常見，較低原頭節數量不易誘發和觀察免疫效果。
5 總結及展望
包蟲病作為一種嚴重致死性寄生蟲疾病，目前治療手段并不豐富[38-39]，對于“包蟲-宿主”炎性反應微環境的認識仍不清楚[40]，手術切除聯合術后藥物治療仍是治療包蟲病的首選方案。但是由于起病隱匿，且患者位于偏遠地區，往往疾病發現時已處于晚期，只能進行對癥支持和藥物治療，但是效果都不理想。攻克包蟲病，需“防治結合”。
預防方面，重在環境和衛生教育以及疫苗研發。2019年Lass 等[41]對波蘭105份河流水樣（各50 L）行采用rtPCR方法檢測多房棘球蚴的12S rRNA后發現，多房棘球蚴基因檢出陽性率高達1.9%，表明水源環境蟲卵污染仍是需要關注的問題。在疫苗方面，與血吸蟲、瘧疾等其他寄生蟲相比，包蟲疫苗研究相對落后，這可能與其復雜的生活史和結構改變有關，盡管在Eg95疫苗和犬用疫苗方面有較大進展，但人用疫苗的空白仍是當今包蟲病防護需要關注的核心問題之一。
最后，在科技日新月異的21世紀，伴隨著5G技術、遠程醫療（遠程影像診斷、實時疫區動態診斷數據、疫情匯報制度）、人工智能、納米藥物等的發展，新世紀信息科技革命和醫療診療技術變革的交匯，必將孕育包蟲病防控新內涵。我們相信，中國最終會清滅包蟲病，徹底改變“因包蟲病致貧、因包蟲病返貧”的狀況，也一定能夠為全球樹立包蟲病防控的典范。
重要聲明
利益沖突：所有作者聲明無利益沖突。
作者貢獻：楊先偉負責文獻收集、論文撰寫及修改；陶浪、魏金文和劉謹賢參與文獻檢索及論文修改。