目的 探討以殼聚糖（chitosan，CS）負載肌腱干細胞（tendon-derived stem cells，TDSCs）構建的可注射型水凝膠（以下簡稱TDSCs/CS水凝膠）促進兔肩袖腱-骨愈合的效果。方法 取3只成年新西蘭大白兔肩袖組織，采用Henderson分步酶消化法分離培養TDSCs，并經多向分化及流式細胞術鑒定。以CS包裹第3代TDSCs構建TDSCs/CS水凝膠，體外培養1～5 d以細胞計數試劑盒8（cell counting kit 8，CCK-8）法檢測水凝膠中TDSCs增殖情況，并以單純TDSCs作為對照，評估TDSCs/CS水凝膠細胞相容性。另取36只成年新西蘭大白兔，隨機分為3組（n=12），分別為肩袖修復組（對照組）、肩袖修復+CS水凝膠注射組（CS組）、肩袖修復+DSCs/CS水凝膠注射組（TDSCs/CS組）。3組建立肩袖損傷+單排技術修復模型后，CS組及TDSCs/CS組將對應水凝膠注入腱-骨界面處修復肩袖，對照組不作其他處理。術后觀察動物一般情況，于4、8周取材，實時定量PCR（real-time quantitative PCR，qPCR）檢測腱-骨界面成肌腱相關基因（腱調蛋白、轉錄因子），成軟骨相關基因（蛋白聚糖、性別決定區Y框蛋白9），成骨相關基因（ALP、人Runt相關轉錄因子2）表達；另于8周取材行HE、Masson染色觀察并行組織學半定量評分，生物力學測試修復肩袖極限載荷和失效部位，評價組織愈合情況和生物力學特性改變。結果 CCK-8法檢測示共培養后CS水凝膠可促進TDSCs增殖（P<0.05）。術后各組動物均存活至實驗完成。術后4、8周，TSDCs/CS組的成肌腱、成軟骨、成骨相關基因相對表達量均高于CS組和對照組（P<0.05），TSDCs/CS組組內術后8周上述基因相對表達量亦高于術后4周（P<0.05）。組織學染色示TDSCs/CS組腱-骨界面處有清晰的軟骨組織和致密有序膠原形成，半定量分析結果示TDSCs/CS組與對照組相比，細胞數量、膠原纖維分布以及組織學評分增高（P<0.05），血管數量降低（P<0.05）；TDSCs/CS組與CS組相比，膠原纖維分布以及組織學評分均增高（P<0.05），而細胞數量、血管數量差異無統計學意義（P>0.05）。生物力學檢測示所有樣本測試過程中均在修復部位失效，TDSCs/CS組極限載荷高于對照組（P<0.05），但與CS組比較差異無統計學意義（P>0.05）。結論 TDSCs/CS水凝膠可以誘導兔肩袖肌腱和骨之間的軟骨再生，促進腱-骨愈合。