目的 改進雪旺細胞（Schwann cells，SCs）原代培養方法，以獲得大量高純度SCs；研究豬小腸黏膜下層（small intestinal submucosa，SIS）與SCs的生物相容性；通過復合SCs，使SIS負載NGF。 方法取2～3日齡SD乳鼠雙側坐骨神經，以胰蛋白酶、Ⅱ型膠原酶分步消化，差速貼壁20 min，G418處理48 h，含2.5%FBS的H-DMEM培養基培養；MTT法檢測SCs增殖情況，抗S-100免疫熒光染色檢測SCs純度。將第3代SCs和SIS復合培養，行HE染色和掃描電鏡觀察兩者復合生長情況，復合培養1、2、3、4、5、7 d ELISA法檢測培養上清中NGF含量。復合培養3、5、7、10、13、15 d后反復凍融脫細胞處理，ELISA法檢測脫細胞后SIS中NGF含量。 結果純化后的SCs純度達98%以上；MTT檢測示SCs傳代后3 d進入對數生長期，7 d后進入平臺期。HE染色和掃描電鏡觀察均顯示SCs在SIS上黏附良好，細胞形態呈紡錘形，有明顯突起，分泌較多細胞外基質。ELISA檢測發現SCs與SIS復合培養后，培養上清中的NGF含量隨時間延長而逐漸升高，與同時間點對照組比較差異均無統計學意義（P gt; 0.05）。通過與SCs復合后反復凍融脫細胞，SIS中NGF含量在培養10 d達峰值（414.29 ± 20.87）pg/cm2，顯著高于未復合細胞的單純SIS材料中NGF含量（4.92 ± 2.06） pg/ cm2，比較差異有統計學意義（P lt; 0.05）。 結論聯合雙酶消化、差速貼壁、G418處理、低濃度酶消化和低濃度血清培養，可在較短時間內獲得大量高純度SCs。SCs與SIS復合生長相容性好，不影響SCs的NGF分泌。通過與SCs的復合、反復凍融脫細胞后，SIS中負載了大量NGF，有望成為良好的神經修復材料。
目的構建用于膀胱修復與重建的聚氨酯（polyurethane，PU）-膀胱脫細胞基質（bladder acellular matrix，BACM）復合支架，并對其力學性能和生物相容性進行體內外評價。 方法取10只雄性新西蘭大白兔膀胱，經1% SDS及1% Triton X-100脫細胞處理后，用PU乳液對所得BACM進行表面涂覆，獲得PU-BACM復合支架；用力學試驗儀測試BACM與PU-BACM支架的拉伸強度及斷裂伸長率。將人膀胱平滑肌細胞（human bladder smooth muscle cells，HBSMC）分別與BACM、PU、PU-BACM支架共培養，通過細胞計數試劑盒8法比較各組材料對細胞增殖的影響。以DMEM培養基制得上述3種材料浸提液，并以DMEM培養基作對照，與HBSMC共培養，流式細胞儀測定細胞周期。取12只雄性新西蘭大白兔膀胱剪開5 mm小口，將PU-BACM支架以鎖邊法縫合于膀胱切口部位以建立膀胱損傷修復模型，術后10、20、40、60 d取材行HE染色觀察炎性浸潤、材料降解和上皮再生情況。 結果BACM和PU-BACM的拉伸強度分別為（5.78±0.85）N和（11.88±3.21）N，斷裂伸長率分別為14.46%±3.21%和23.14%±1.32%，差異均有統計學意義（t=3.182，P=0.034；t=4.332，P=0.012）。細胞增殖實驗顯示，體外培養5、7 d后，PU-BACM支架組細胞增殖顯著高于BACM組（P＜0.05）；細胞周期實驗中，對照組及PU、BACM、PU-BACM組的細胞增殖率分別為36.78%±1.21%、30.49%±0.89%、18.92%±0.84%和22.42%±1.55%，PU-BACM組顯著高于BACM組（P＜0.05）。兔膀胱修復實驗中，術后10 d移植部位出現單核炎性細胞浸潤情況；20 d炎性反應逐漸減弱、材料逐步降解；40 d觀測到上皮再生；60 d移植部位形成與正常組織類似結構，修復基本完成。 結論PU-BACM復合支架較BACM力學性能及生物相容性均有顯著提升；在兔膀胱修復實驗中，復合支架未導致強烈的免疫反應，并在移植部位形成新生膀胱組織，可為進一步研究提供基礎數據。