目的建立樂伐替尼肝細胞肝癌（簡稱“肝癌”）細胞耐藥模型，以研究雙硫侖聯合銅離子對樂伐替尼耐藥細胞 Huh7 增殖和凋亡的影響。方法通過 CCK8 法檢測樂伐替尼作用下 Huh7 細胞的半抑制濃度（IC50），采用濃度遞增法誘導 Huh7 細胞樂伐替尼耐藥。各組細胞處理：對照組為 Huh7 細胞加普通培養液培養后的細胞；敏感組為 Huh7 細胞加 10 μmol/L 樂伐替尼培養后的細胞；耐藥組為耐藥 Huh7 細胞加 10 μmol/L 樂伐替尼培養后的細胞；聯合組為耐藥 Huh7 細胞加 10 μmol/L 樂伐替尼+1 μmol/L 雙硫侖+0.5 μmol/L 銅離子培養后的細胞；抑制劑組為耐藥 Huh7 細胞加 10 μmol/L 樂伐替尼+10 μmol/L Akt 抑制劑 MK2206 培養后的細胞。CCK8 法及流式細胞術分別檢測細胞的存活率和凋亡率；Western blot 法檢測磷酸化-Akt（p-Akt）和半胱氨酸蛋白酶 9（caspase-9）和 B 淋巴細胞瘤 2（Bcl-2）蛋白表達；Transwell 法檢測細胞侵襲性。結果樂伐替尼耐藥細胞系成功建立，選取 10、20、40、60、80 及 160 μmol/L 6 個樂伐替尼濃度對 Huh7 細胞作用 48 h 后計算得出細胞 IC50 為 12.35 μmol/L。耐藥組細胞存活率明顯高于敏感組（P<0.01），聯合組細胞存活率明顯低于耐藥組（P<0.01），抑制劑組細胞存活率明顯低于耐藥組（P<0.05）。與耐藥組比較，聯合組及抑制劑組 p-Akt 蛋白表達明顯降低（P<0.01）、caspase-9 明顯升高（P<0.01），而 Bcl-2 蛋白在耐藥組和聯合組間比較差異無統計學意義（P>0.05）。聯合組細胞凋亡率明顯高于耐藥組（P<0.01）。Transwell 結果顯示聯合組的腫瘤細胞侵襲數明顯少于耐藥組（P<0.01）。結論雙硫侖聯合銅離子能增加樂伐替尼對樂伐替尼耐藥肝癌細胞 Huh7 的敏感性，同耐藥組相比其細胞抑制率明顯提高，其機制可能與抑制磷脂酰肌醇-3-激酶/Akt 通路及促進 caspase-9 蛋白表達有關。